轉茶陵野生稻三個耐冷候選基因擬南芥的創(chuàng)制及其表型分析.pdf

1、湖南茶陵普通野生稻(Oryza rufipogon Griff.)是兩個北緣野生稻居群之一，前人的研究表明其耐冷性很強?？寺∑淠屠湎嚓P基因，不僅能給栽培稻的耐冷轉基因分子育種提供目的基因資源，而且可增進我們對野生稻耐冷分子機制的認識，具有重要價值。
　　OrCr、OrCr2及OrCr3(Oryza rufipogon cold responsive gene 1,2,3)是采用水稻全基因組表達芯片分析以及生物信息學分析從茶陵野生稻

2、中鑒別出的3個受低溫誘導而顯著上調的耐冷候選基因。
　　為了探明這3個耐冷候選基因是否具有耐冷作用或其它作用，通過農桿菌介導法轉化了擬南芥，獲得了轉OrCr1，2，3基因擬南芥植株，并篩選出純系。
　　對獲得的轉OrCr1，2，3基因擬南芥純系的耐逆性進行了鑒定，初步結果如下:
　　1)轉OrCr1，2,3基因擬南芥經過4℃低溫處理20d后其發(fā)芽率高于野生型，幼苗的生長勢強于野生型;
　　2)轉OrCr1，2，3

3、基因擬南芥經過43℃處理3h后生長勢與野生型無顯著性差異;
　　3)轉OrCr3基因擬南芥在150mM NaCl條件下生長10d的發(fā)芽率與根系長勢高于或強于野生型，而轉OrCr1，2基因擬南芥與野生型發(fā)芽率與根系長勢無顯著差異;
　　4)在滲透脅迫（300mM甘露醇培養(yǎng)基中萌發(fā)10d）下，轉OrCr3基因擬南芥發(fā)芽率明顯低于野生型并且根長短于野生型，而轉OrCr1，2基因擬南芥與野生型發(fā)芽率與根系長勢無顯著性差異;
　

4、　5)在0.4μM-0.8μM脫落酸處理下，轉OrCr1，2，3基因擬南芥植株均增加對脫落酸的敏感性，尤其在0.8μM脫落酸中，轉OrCr1，2,3基因擬南芥幾乎不萌發(fā)，而野生型正常萌發(fā);隨著脫落酸處理濃度的升高，根系長度逐漸降低或者不萌發(fā)，而到0.8μMABA時，轉OrCr1，2,3基因擬南芥根幾乎不生長，而野生型擬南芥根系長度稍微低于正常條件下的擬南芥根長。
　　以上結果說明:OrCr1，2，3基因在擬南芥中異位表達能提高擬南