番茄黃化曲葉病毒分子鑒定及致病性研究.pdf

1、番茄(Lycopersicon esculentum M)是世界范圍內(nèi)廣泛種植的主要蔬菜之一,但近些年由于番茄黃化曲葉病毒(Tomatoyellow leaf curl virus)的大規(guī)模爆發(fā)給番茄生產(chǎn)帶來(lái)了巨大影響,造成了嚴(yán)重?fù)p失。該病毒是一種由煙粉虱傳播的雙生病毒,嚴(yán)重影響番茄品質(zhì)和產(chǎn)量,甚至可以造成番茄絕收。目前該病毒病在上海郊區(qū)也有大面積發(fā)生,已成為影響該地區(qū)番茄種植的主要障礙之一。近幾年來(lái)專家們一直致力于尋求解決這一問題的方

2、法,其中篩選和培育抗病品種被認(rèn)為是解決該病害問題最有效、最直接的方法。而開展番茄抗病基因的分子標(biāo)記和品種資源的抗病鑒定、評(píng)價(jià)工作,則有助于建立番茄分子標(biāo)記輔助選擇育種體系,獲得更多、更準(zhǔn)確的抗源材料,促進(jìn)番茄抗病育種水平的顯著提高。本研究對(duì)上海農(nóng)科院園藝所番茄組提供的番茄材料進(jìn)行病毒病和抗病基因的鑒定,并在大田中用自然傳毒的方法對(duì)分子鑒定的抗性基因結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。經(jīng)鑒定含純合抗性基因的株系,則可用于雜交育種,從而培育出更多優(yōu)良的含復(fù)合抗性

3、基因的品種。該實(shí)驗(yàn)對(duì)番茄抗病育種研究具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
　　從上海、山東、河北地區(qū)采集了表現(xiàn)為黃化曲葉病的番茄樣本,用兼并引物PA/PB擴(kuò)增,均得到500bp的目的片段,克隆測(cè)序后在 GenBank上比對(duì)分析,均為番茄黃化曲葉病毒(Tomato Yellow Leaf Curl Virus,TYLCV)。各地區(qū) TYLCV分離物具有很高的同源性,其同源性均超過(guò)98.9％,而與其他雙生病毒親緣關(guān)系相對(duì)較遠(yuǎn)。
　　對(duì)上海市農(nóng)科院

4、園藝所抗雙生病毒的番茄抗性材料提取 DNA,利用已經(jīng)報(bào)道的分子標(biāo)記,初步分析這些材料攜帶抗病基因 Ty-1、Ty-2、Ty-3。目前番茄材料中含有最多的抗性基因?yàn)?Ty3,其次是 Ty1-1,最少的是 Ty2,其中含有Ty-3/ Ty-3(純合抗病)的田間均表現(xiàn)為抗病。并對(duì)分子標(biāo)記結(jié)果與田間試驗(yàn)符合率為97.3%。
　　構(gòu)建了侵染番茄的兩種雙生病毒(HaNHK7與 PaLCCNV)侵染性克隆,致病性測(cè)定表明,均可以系統(tǒng)侵染番茄、本