蒙古沙冬青AmCAT和AmZF基因的克隆與功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、前人研究表明,過氧化氫酶(Catalase,CAT)和鋅指型轉錄因子(zinc finger transcription factor,ZF)在植物響應和抵抗多種非生物逆境中起重要作用。本論文從強抗逆植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中克隆到AmCAT和AmZF的cDNA,并對二者在高鹽、低溫和干旱脅迫下的表達進行了動態(tài)分析,然后將它們分別轉入擬南芥進行了功能鑒定,主要研究結果如下:
  (1)用

2、RT-PCR方法擴增到AmCAT的編碼區(qū)cDNA,由1479bp組成,推測其編碼蛋白含493個氨基酸殘基,分子量為56.86 KDa,等電點為7.25,可能為親水性蛋白,定位在過氧化物酶體中。
  (2) AmCAT的表達受高鹽、低溫和干旱脅迫的顯著誘導,尤其在干旱和鹽脅迫下其表達量持續(xù)上調。
  (3)將AmCAT編碼區(qū)cDNA片段連接到植物表達載體pCAMBIA3301的35S啟動子之后,利用農桿菌介導法轉化擬南芥。通過

3、對轉基因株系在干旱、高鹽和外源ABA等處理下進行表型鑒定,發(fā)現AmCAT在耐旱和耐鹽性中起正調節(jié)作用,而對外源ABA敏感性起負調節(jié)作用。
  (4)用RT-PCR方法擴增到AmZF的編碼區(qū)cDNA,由441bp組成,預測其編碼蛋白含146個氨基酸殘基,分子量為16.31KDa,等電點為9.14,可能為親水性蛋白,主要定位在細胞質中。
  (5) AmZF的表達受干旱、低溫和高鹽脅迫的顯著誘導,尤其在干旱、低溫脅迫下其表達量持

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