組成型乳酸菌表達載體的構(gòu)建及表達效果的比較.pdf

1、ClassifiedIndex：Confidential(yes／no)：noCode：10224NO1106445DissertationfortheMasterDegreeConstructionofconstitutivelactobaciUusexpressionvectorandC0mparlsonolthe1●n。oex!Dresslonel。’l?！痚ct。Candidate：JuLongzhu?！??！甈rofL。Yiji

2、ngsuoervlsor：rotL11DegreeCategory：MasterofAgricultureCollege：VeterinaryMedicineFirstleveldiscipline：VeterinaryMedicineSecondleveldiscipline：PreventiveVeterinaryMedicineHarbinChinaJune2014東北農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文量皇皇置邑曼曼曼曼曼曼皇量量曼曼曼曼量曼暑

3、蔓舅舅舅量量量篁II皇皇曼曼鼉皇蔓皇曼曼鼉量皇曼曼量量曼皇皇皇皇量曼皇曼3結(jié)果2731目的基因的克隆與序列測定27311日的基因的PCR擴增結(jié)果27312重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定結(jié)果2832PgsAanchor多克隆抗體的制備30321原核表達載體pET32a—PgsA的構(gòu)建30322PgsAanchor基因在大腸桿菌中表達產(chǎn)物的SDS—PAGE鑒定3l323重組蛋白表達鑒定及純化3l324間接ELISA檢測重組PgsAanchor抗血清效

4、價～3233重組十酪乳桿菌表達系統(tǒng)的構(gòu)建33331重組干酪乳桿菌表達載體pPG—PPT與pPGPPuT的構(gòu)建圖譜33332表達a毒素的重組干酪乳桿菌的構(gòu)建3334重組千酪乳桿菌PgsAanchor和0【毒素融合表達蛋白的鑒定36341表達產(chǎn)物的SDS—PAGE鑒定36342表達產(chǎn)物的WesternBlot鑒定3635重組干酪乳桿菌表達載體的優(yōu)化38351重組質(zhì)粒pMDl8一TS—T7910、pMDl8一TS—Q的酶切簽定38352重組菌

5、pPG—T7910PPaT／TGl、pPG—Q—PPctT／TGl的鑒定39353重組干酪乳桿菌pPG—T7910一PP俚T／Lcasei393、pPG—Q—PPaT／厶casei393一3936優(yōu)化后重組菌蛋白表達的鑒定及其與優(yōu)化前重組菌蛋白表達情況的比較分析一40361表達產(chǎn)物的WesternBlot鑒定40362表達產(chǎn)物的問接ELISA鑒定40363重組菌中mRNA熒光定量PCR相對定量分析42364表達產(chǎn)物流式細胞術(shù)檢測4436

6、5表達產(chǎn)物的問接免疫熒光定位檢測45366表達產(chǎn)物的激光共聚焦定位檢測464討侖4841PgsAanchor與旺毒素蛋白融合表達一4842T7910與omega增強予的插入4943三種重組菌Q毒素蛋白表達量ELISA結(jié)果比較分析4944三種重組菌mRNA轉(zhuǎn)錄水平比較分析4945重細茼的蛋白表達帚流式細胞術(shù)結(jié)果比較分析5046重紕菌表面表達蛋白的問接免疫熒光與激光共聚焦分析5047熒光定量PCR方法的應用5048組成型乳酸菌表面表達載體的