高粱ATP合成酶E亞基編碼基因(SbATPase-E)的克隆及其抗逆功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、干旱嚴重的影響了作物的生長和產(chǎn)量。利用基因工程的手段提高作物的抗旱性成為作物育種中的一個重要途徑。其中，獲得有價值的目標基因成為這一途徑的瓶頸。因此，快速高效的挖掘抗旱基因在作物育種中有著重要的意義。
　　全長cDNA過表達系統(tǒng)[FOX(Full-length cDNA over-expressing gene)hunting system]只需要知道全長cDNA就可以解析基因功能。本實驗在前期構(gòu)建的高粱全長cDNA文庫中篩選抗旱

2、相關(guān)基因。對其中的一個SbATPase-E基因進行了詳細的功能鑒定。主要的實驗結(jié)果如下:
　　(1)利用FOX全長cDNA過表達系統(tǒng)篩選高粱抗旱相關(guān)基因
　　實驗室前期構(gòu)建高粱FOX擬南芥庫，對轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代進行干旱處理，收獲存活單株。T3代表型鑒定及分子水平鑒定，得到7個與抗旱相關(guān)的基因。
　　(2)SbA TPase-E基因抗逆相關(guān)功能研究
　　從篩選到的7個抗旱相關(guān)基因中選擇SbATPase-E基因進行

3、詳細的功能研究。發(fā)現(xiàn)該基因提高了轉(zhuǎn)基因擬南芥的耐旱性和耐鹽性。為了進一步研究該基因的功能，對過表達轉(zhuǎn)基因擬南芥的耐旱性、耐鹽性、種子萌發(fā)率以及抗逆性相關(guān)基因進行了鑒定。NaCl和ABA處理的過表達轉(zhuǎn)基因擬南芥種子萌發(fā)率顯著提高。甘露醇、氯化鈉處理下轉(zhuǎn)基因擬南芥根部相對于野生型發(fā)達。逆境條件下轉(zhuǎn)基因擬南芥植株較野生型植株根系發(fā)達很可能是轉(zhuǎn)基因植株較野生型植株耐旱性和耐鹽性提高的主要原因。NaCl和ABA處理下的高粱幼苗相對于正常生長條件下

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