I型馬立克氏病病毒pp38和pp24基因的表達及序列測定與分析.pdf

1、該研究將I型MDV Md11株的pp24基因的完整ORF克隆入原核表達載體pGEX-6P-1中,重組質粒pGEX-pp24轉化BL21宿主菌后,經(jīng)IPTG誘導表達.誘導菌體裂解物經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)后,用山羊抗GST抗體進行Western-blotting試驗,結果確證了GST-pp24融合蛋白的表達.將表達產(chǎn)物從凝膠中回收,免疫4周齡小白鼠,五次免疫后,采血分離血清.所得血清分別與GA、Md11和CVI98

2、8株MDV感染的雞胚成纖維細胞(CEF)進行間接免疫熒光試驗(IFA),結果表明大腸桿菌表達的pp24基因至少保留了部分天然pp24蛋白的抗原性.另外,該文還用pp38特異的PCR產(chǎn)物標記的核酸標記的核酸探針,對來自包括臺灣在內(nèi)的全國10個省37個雞群共792只雞的病理組織樣品進行了檢測,同時用REV SNV株全基因組cDNA克隆標記的探針檢測REV,用CAV Cux-1株全基因組克隆標記的探針檢測CAV.結果表明:發(fā)病雞中這三種病毒的

3、檢出率均相當高.分別為84％(MDV)、62.8％(CAV)、和58.8％(REV);病雞中存在非常嚴重的雙得感染(32.6％)和三重感染(45.7％);37個雞群中的28個存在三重感染(75.6％),5個雞群存在MDV和CAV的共感染(13.5％),3個雞群存在MDV和REV的共感染(8.1％),僅有1個雞群未檢測到這三種病毒;在地域分布上,除了廣西未檢測到CAV外,其余的9個省份均檢測到了MDV、CAV和REV,顯示這三種病毒在中國