23841.雙水相溶劑體系的正交軸逆流色譜及其應用研究

1、碩士學位論文題目雙水相溶劑體系的正交軸逆流色譜及其應用研究雙水相溶劑體系的正交軸逆流色譜及其應用研究英文題目Sudyapplicationofthecrossaxiscountercurrentchromatographyofaqueousaqueousphasesystems姓名袁海華學號11108059所在學院理學院導師姓名劉楊教授專業(yè)生物化學與分子生物學入學日期2011年9月答辯日期2014年6月汕頭大學碩士學位論文I摘要摘要正交

2、軸逆流色譜（XaxisCPC）是高速逆流色譜（HSCCC）的一種，是一種流動相和固定相都為液相的色譜技術。其原理是依據(jù)物質分配系數(shù)不同而實現(xiàn)分離，具有分離環(huán)境溫和、產品回收率大、純度高、操作簡單等優(yōu)點，非常適合于生物大分子的分離。正交軸逆流色譜儀（XaxisCPC）與普通的高速逆流色譜儀最大的不同就是其自轉軸和公轉軸相互垂直，其運動方式能形成三維的不對稱離心力場，使運動螺旋管內兩相的流體動力狀態(tài)表現(xiàn)為特殊的形式，非常有利于親水性的較高粘

3、度溶劑系統(tǒng)固定相保留，適用于生物大分子樣品的分離制備。本論文以雙水相體系為為研究對象，以模型蛋白和藻藍蛋白為目標分離蛋白，探索雙水相正交軸逆流色譜分離蛋白的可行性。具體研究內容包括以下幾部分：第一部分正交軸逆流色譜儀設計方案研究。通過查閱相關資料文獻，設計六分離柱的正交型逆流色譜儀，包括分離柱尺寸大小，流通管內徑及纏繞層數(shù)，以及逆流色譜儀重要參數(shù)如分離柱橫向位移δ值、自轉半徑公轉半徑比值β值等。最后將設計稿交由制造方進行制造。第二部分可

4、用于正交軸逆流色譜分離的聚乙二醇（PEG）鹽雙水相體系的物化性質及分相行為的研究。研究了兩類雙水相體系，PEG有機鹽（檸檬酸鈉），PEG無機鹽（硫酸銨）其中PEG的分子量包括1000、2000、4000、6000，系線長度包括30、35、40、45、50。結果顯示，雙水相體系的密度隨著系線長度的增加而增大；粘度隨PEG分子量增加而增大，并且體系上相的粘度隨著系線長度的增加而增大；體系的界面張力隨著系線長度的增加而增大。同時以PEG檸檬酸

5、鈉和PEG硫酸銨雙水相體系為例，通過測定其相圖中不同區(qū)域成相點的分相速率及相行為變化。鑒定出相圖中上相連續(xù)與下相連續(xù)的區(qū)域，并且發(fā)現(xiàn)了上相連續(xù)區(qū)域和下相連續(xù)區(qū)域之間的相反轉臨界區(qū)域。測定出兩個相連續(xù)區(qū)域中雙水相體系的分相時間，并將PEG檸檬酸鈉和PEG硫酸銨雙水相體系的物化性質同體系的分相速率進行回歸分析，擬合出其兩相相比為1的經(jīng)驗方程。計算出的相關系數(shù)的平方分別為0.960，0.971。第三部分雙水相正交軸逆流色譜實驗。本課題研究了不