狂犬病鼠源野毒M株核蛋白基因克隆與序列分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該實驗以測定狂犬病鼠源野毒株(MRV)的N基因序列為主要研究內(nèi)容,目的在于研究MRV株的分子生物學特性,探討其基因型與現(xiàn)用狂犬病疫苗株N基因的差異和關系,為研制有效的常規(guī)疫苗和基因疫苗、診斷試劑及全基因序列的測定提供有關數(shù)據(jù).該研究應用成熟的RT-PCR技術,根據(jù)已發(fā)表的狂犬病毒PV株基因序列設計了一對引物,對狂犬病野毒MRV株核蛋白全基因進行了擴增,而后將目的片段與T載體相連并轉入DH5α,獲得了重組載體.將其命名為pGEM-T/NP

2、,應用DNAStar的MegAlign軟件將目的片段的測序結果與已發(fā)表的幾株狂犬病毒CVS、8202、CTN、ERA、HEP-flury、PV、RC-HL、SADB19及Mokola株進行比較分析,結果表明MRV株與CVS株的核苷酸和氨基酸的同源性最高,分別為99.8％和99.6％,兩者均屬于同一個基因型,為基因Ⅰ型并在同一個亞型之中.此外,比較發(fā)現(xiàn)各毒株抗原位點除Mokola株抗原位點與各毒株差異較大外,其它各毒株均略有差異,MRV株

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