包埋脫水法冷凍保存裙帶菜配子體的研究.pdf

1、本文以裙帶菜配子體為實驗材料，用包埋脫水法進行超低溫和常低溫保存。將裙帶菜配子體包埋在含3％褐藻酸鈣的膠球中，在超低溫保存的過程中，研究了預(yù)培養(yǎng)中的蔗糖濃度和培養(yǎng)時間，脫水過程中的脫水速率和膠球含水量，以及化凍速度對配子體存活率和發(fā)育能力的影響；在常低溫保存的過程中研究了，溫度、含水量以及光照對配子體存活率的影響。 超低溫保存的結(jié)果表明：1蔗糖濃度和預(yù)培養(yǎng)時間對配子體存活率的影響將含裙帶菜配子體的膠球分別在0.2mol/L、0.

2、3mol/L、0.4mol/L、0.5mol/L的蔗糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)3h、6h、9h、12h，蔗糖預(yù)培養(yǎng)對配子體的存活率影響很大，膠球在0.3mol/L的蔗糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)9h可以獲得較高的存活率。 2膠球最適平均脫水速率對配子體存活率的影響配子體包埋后分別以含水量每小時減少1％、2.5％、5％、8％、10％、15％、25％的平均脫水速率脫水，結(jié)果裙帶菜配子體在平均脫水速率5％時獲得的存活率最高。 3膠球含水量對配子體存活率

3、的影響以5％含水量/h的脫水速率進行脫水，使膠球的含水量為15％、25％、35％、45％、55％、65％、85％，結(jié)果膠球在最后含水量為25％的時候獲得了最高的存活率。 4化凍溫度對配子體克隆的存活率化凍溫度對配子體存活率的影響很大，研究表明，配子體在凍存管化凍時隨著化凍溫度的提高存活率提高，而在溶液中化凍時當(dāng)化凍溫度達到25℃時配子體的存活率最高，當(dāng)溫度再升高時存活率開始下降，即溶液化凍的溫度為25℃時配子體存活率為最高(73