山羊表皮干細(xì)胞分離純化的研究.pdf

1、　　表皮干細(xì)胞(EpiSCs)是具有無(wú)限增殖潛能、通過(guò)對(duì)稱(chēng)或不對(duì)稱(chēng)分裂方式自我更新并不斷產(chǎn)生功能性細(xì)胞以維持表皮穩(wěn)態(tài)的一個(gè)細(xì)胞群。EpiSCs定位于兩個(gè)部位：表皮基底層和毛囊隆突。正是表皮干細(xì)胞的內(nèi)在屬性和微環(huán)境的外部刺激維持了EpiSCs的干細(xì)胞特性。近年來(lái)，EpiSCs在皮膚創(chuàng)傷愈合、構(gòu)建人工皮膚、細(xì)胞治療上都顯示出巨大的應(yīng)用潛力。應(yīng)用于臨床的第一個(gè)重要的步驟是分離出能在體外大量擴(kuò)增的干細(xì)胞群作為種子細(xì)胞。本試驗(yàn)的目的就是為了獲得具

2、有長(zhǎng)期更新能力的山羊EpiSCs，并檢測(cè)EpiSCs的相關(guān)特性，為下一步的組織工程研究提供種子細(xì)胞。本試驗(yàn)內(nèi)容如下。　　1.組織塊法分離EpiSCs。對(duì)關(guān)中奶山羊皮膚消毒處理后，器械法分離表皮和真皮。將表皮分別干置5min，10min，20min，30min，以確定最佳貼壁效果?！　?.酶消化法分離EpiSCs。結(jié)合Dispase酶和胰酶對(duì)組織塊進(jìn)行處理，分離出表皮后，用Ⅳ型膠原快速粘附法分離EpiSCs，分別選擇5min，10mi