納米聚乙烯亞胺載體介導質粒在乳鼠心肌細胞中轉導的實驗研究_第1頁
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文檔簡介

1、徐州醫(yī)學院碩士學位論文納米聚乙烯亞胺載體介導質粒在乳鼠心肌細胞中轉導的實驗研究姓名：姚建國申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學（胸心外）指導教師：張中明20060501徐州醫(yī)學院胸心外科碩士研究生畢業(yè)論丈納米聚乙烯亞胺載體介導質粒在乳鼠心肌細胞中轉導的實驗研究[中文摘要]目的：探討國產的869nm粒徑的聚乙烯亞胺(p01yethylenimine，PEI)載體對體外非分裂型乳鼠心肌細胞的基因轉導效率及其可能影響因素，測定納米PEI載體在乳鼠心

2、肌細胞中基因轉導效率、最佳的基因轉導條件和毒性作用。分析PEI納米載體的性能，進一步的理解納米載體在心肌細胞基因轉導中的理論意義，并探討其可能的應用價值。方法：應用裂解法擴增含增強型綠色熒光蛋白DNA質粒(enhancedgreenfluo—rescenceprotein，plEGFP)，Qiagn柱抽提純化質粒；用ThemloMultiskanSpectrum測OD260、OD280值，按公式：質粒樣品濃度=OD260稀釋倍數x50／

3、1000(gg／91)計算質粒產量。采用低濃度胰蛋白酶消化法，分離新生Sprague—Dawiey(SD)大鼠心肌細胞，并進行體外培養(yǎng)，利用心肌肌鈣蛋白I免疫細胞化學染色法測定心肌細胞純度。應用不同劑量的PEI，進行實驗分組：A組(2／ag)、B組(499)、C組(699)、D組(899)、E組(10pg)和G組(099)，分別結合等劑量plEGFP(299)，轉染培養(yǎng)的乳FJ心肌細胞，F組(41ag)結合plEGFP(2btg)體外轉

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