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1、 轉(zhuǎn)移因子(transferfactor,TF)是從淋巴細(xì)胞中提取的一類低分子肽與核苷酸復(fù)合物,它能夠?qū)⒐w的細(xì)胞免疫功能轉(zhuǎn)移給受體,尤其是非特異性TF能夠提高受體天然免疫和特異性免疫功能的特性使其在人類和多種動(dòng)物疾病防治中獲得普遍應(yīng)用。弄清TF增強(qiáng)犬免疫功能的細(xì)胞和分子機(jī)制,無疑將為TF臨床用于犬病尤其是犬傳染病的防治提供理論依據(jù)和指導(dǎo)?! ”狙芯渴紫忍崛≈苽淞搜芯克枰呢i、犬TF,然后選擇雜種牧羊犬作為實(shí)驗(yàn)犬,用MTT法檢測(cè)了
2、實(shí)驗(yàn)犬注射豬TF、犬TF前后不同時(shí)間的淋巴細(xì)胞增殖效果、用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)了T細(xì)胞亞群的動(dòng)態(tài)變化。試驗(yàn)獲得如下結(jié)果: 1.制備的豬TF、犬TF理化性質(zhì)相似,制備的TF可供本研究使用。 2.淋轉(zhuǎn)試驗(yàn)中,探討不同濃度犢牛血清(FCS)、淋巴細(xì)胞、植物血凝素P(PHA-P)和刀豆蛋白A(ConA)對(duì)犬淋巴細(xì)胞增殖的影響。確定了犢牛血清含量為10﹪,淋巴細(xì)胞濃度為5×106個(gè)/mL,用絲裂原PHA-P刺激的最佳濃度為12.5μg/mL時(shí),
3、MTT法測(cè)定能夠刺激犬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化增殖,但t檢驗(yàn)分析表明其促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖的效果并不顯著;當(dāng)其它條件不變,所用的絲裂原為ConA時(shí),它在濃度為0.5~2.5μg/mL范圍內(nèi)均可以顯著刺激T細(xì)胞的增殖(P<0.05),且在濃度為2.5μg/mL時(shí)刺激效果最佳。 3.同種、異種TF均可以單獨(dú)刺激犬淋巴細(xì)胞增殖,但同種TF的作用效果要優(yōu)于異種TF。在分別協(xié)同PHA-P和ConA刺激淋巴細(xì)胞增殖時(shí),同種、異種TF均可以刺激T細(xì)胞發(fā)生增殖作用
4、,只是顯著增殖的范圍不同。注射異種TF后,在6~10d內(nèi),犬淋巴細(xì)胞單獨(dú)增殖的能力越來越強(qiáng)。注射了異種TF的犬,其淋巴細(xì)胞再次受到TF單獨(dú)或協(xié)同絲裂原刺激時(shí),淋巴細(xì)胞的增殖能力呈現(xiàn)早期(4~6d)下降趨勢(shì),后期(6d后)受到抑制的現(xiàn)象?! ?.同種、異種TF均可提高犬外周血淋巴細(xì)胞數(shù)量,CD4/CD8比值變化分析證實(shí)外周血增加的淋巴細(xì)胞中主要為CD4+T細(xì)胞。犬注射同種、異種轉(zhuǎn)移因子后在20d內(nèi)CD4+T細(xì)胞呈現(xiàn)持續(xù)增加的規(guī)律。同種T
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