烏司他丁對急性肺損傷水通道蛋白-1調(diào)節(jié)機制的研究.pdf

1、目的：急性肺損傷(ALI)是以通透性肺水腫為特征的一種臨床綜合征，肺水腫是導(dǎo)致急性呼吸功能衰竭的主要病理基礎(chǔ)，但其發(fā)病機理尚未完全闡明。ALI后肺水腫的發(fā)生，雖然涉及的因素較多，但歸結(jié)到一點，就是肺內(nèi)液體滲出與清除失衡的結(jié)果。以往人們普遍認(rèn)為，肺水腫主要是由于肺微血管內(nèi)皮細胞(PMEC)受損所致，而對肺組織存在的水通道蛋白(AQPs)在病理生理條件下的作用認(rèn)識不足。AQP-1主要在肺間質(zhì)內(nèi)液體的轉(zhuǎn)運上發(fā)揮作用，可減輕肺水腫的程度。烏司他

2、丁(UTI)是一種蛋白酶抑制劑，能夠同時抑制胰蛋白酶、磷脂酶A2、透明質(zhì)酸酶、彈性蛋白酶等多種水解酶的活性。對溶酶體膜有穩(wěn)定作用，有抑制炎癥介質(zhì)的過度釋放以及清除氧自由基等功能。我們已有動物實驗證實，烏司他丁可有效地治療急性肺損傷，減輕肺水腫，但其減輕肺水腫的作用機制還不十分明確。為此，本實驗通過復(fù)制油酸型急性肺損傷模型，并利用烏司他丁有效地治療急性肺損傷，研究急性肺損傷大鼠肺組織AQP-1的表達變化及烏司他丁對其的影響，探討烏司他丁治

3、療急性肺損傷的可能機制，為利用烏司他丁治療急性肺損傷提供理論基礎(chǔ)。 方法：應(yīng)用油酸誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷模型，然后應(yīng)用烏司他丁進行干預(yù)。試驗分對照組(10只)，模型組(10只)，烏司他丁組(10只)，治療組(10只)，每組分別于造模后四小時頸外動脈采血進行動脈血氣分析，放射免疫法檢測血清IL-6，TNF—α的含量，免疫組織化學(xué)法檢測肺組織AQP-1的表達，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)法檢測肺組織AQP-1mRNA的表達。

4、 結(jié)果： 1.動物的一般表現(xiàn)：10％烏拉坦麻醉，仰臥固定，模型組經(jīng)頸外靜脈注射0.1ml/kg油酸后，大鼠均出現(xiàn)呼吸急促，口唇紫紺，呼吸困難，點頭呼吸，有哮鳴音，呼吸頻率由給藥前的80-100次增加到120-150次，治療組在給予烏司他丁后情況有所好轉(zhuǎn)，對照組和烏司他丁組則無明顯變化。 2.血氣分析結(jié)果：模型組血氧飽和度和血氧分壓低于對照組(p＜0.05)，烏司他丁組血氧飽和度和血氧分壓與對照組無明顯差別(p＞0.01

5、)，治療組血氧飽和度和血氧分壓高于模型組(p＜0.05) 3.放射免疫結(jié)果：模型組IL-6和TNF—α的血清含量高于對照組(p＜0.05)，烏司他丁組IL-6和TNF—α的血清含量與對照組無明顯差別(p＞0.01)，治療組IL-6和TNF—α的血清含量低于模型組(p＜0.05) 4.免疫組織化學(xué)結(jié)果：模型組AQP-1的表達低于對照組(p＜0.05)，烏司他丁組AQP-1的表達與對照組無明顯差別(p＞0.01)，治療組AQ

6、P-1表達高于模型組(p＜0.05) 5.RT—PCR結(jié)果：模型組AQP-1mRNA的表達低于對照組(p＜0.05)，烏司他丁組AQP-1mRNA的表達與對照組無差別(p＞0.01)，治療組AQP-1mRNA的表達高于模型組(p＜0.05) 結(jié)論：在急性肺損傷模型中，AQP-1mRNA、AQP-1的表達量與IL-6，TNF—α等炎癥介質(zhì)的表達量呈反比。AQP-1的表達減少導(dǎo)致水腫液跨細胞膜的重吸收能力下降，這可能是造成急