厚皮甜瓜未受精胚珠離體培養(yǎng)技術.pdf

1、將乙烯抑制劑AgNO<,3>首次應用于厚皮甜瓜離體雌核誘導,獲得單倍體.對其胚囊發(fā)育途徑做切片觀察,發(fā)現胚囊內卵器繼續(xù)分裂,形成胚狀體,萌發(fā)形成單倍體植株.5月下旬,取開花前1 4h的厚皮甜瓜品系2B39未授粉子房,采用剝胚珠的方法,將含有胚珠的三室胎座分開,接種于預培養(yǎng)基A上,35℃恒溫箱中黑暗熱激4天;而后在25℃光下,含有AgNO<,3>處理的誘導培養(yǎng)基B上誘導2周,AgNO<,3>濃度分別為0,5,1 0,1 5,2 0,30,

2、40,60,80,1 60 mg.L<'-1>;將胚珠從胎座上剝離下來,轉移到胚狀體萌發(fā)和胚芽伸長培養(yǎng)基C上,結果得到6棵由胚狀體萌發(fā)的再生植株,AgNO<,3>濃度為80 mg.L<'-1>時,出胚率達最高0.74％.再生植株經微繁和繼代培養(yǎng)后,共得到1 2棵小苗.通過保衛(wèi)細胞葉綠體計數法進行倍性鑒定,1棵為單倍體,1棵為三倍體,1棵為四倍體,其它為混倍體.對胚珠離體雌核發(fā)育的不同階段進行切片觀察,發(fā)現接種當天,胚囊處于接近成熟的階段