白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A-,2-的神經(jīng)毒性研究.pdf

1、論文研究?jī)?yōu)化了Gln49-PLA2的分離方法，僅采用HitrapSP陽(yáng)離子交換、Superdex75凝膠過濾層析兩步即從長(zhǎng)白山白眉蝮蛇蛇毒中分離出該蛋白。通過添加保護(hù)劑，延長(zhǎng)了Gln49-PLA2抗凝血酶活性的保存時(shí)間；確定了保護(hù)劑及保存條件：添加5﹪(w/v)海藻糖，Gln49-PLA2終濃度為0.6mg/ml，-20℃保存14天，活性為原來(lái)的80.6﹪，7-14天活性穩(wěn)定。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)測(cè)得其LD50為18.2mg/kg。熱板實(shí)

2、驗(yàn)中，腹腔注射Gln49-PLA2的615小鼠痛閾比空白對(duì)照組顯著提高，證明了其鎮(zhèn)痛活性且鎮(zhèn)痛作用呈劑量依賴性；鈉洛酮可有效拮抗Gln49-PLA2的鎮(zhèn)痛活性，說(shuō)明其鎮(zhèn)痛機(jī)理可能與阿片受體有關(guān)。電生理分析，100ug/ml的Gln49-PLA2可降低蟾蜍坐骨神經(jīng)樣本的動(dòng)作電位和傳導(dǎo)速度，說(shuō)明其可能會(huì)影響神經(jīng)元上一些離子通道的性質(zhì)。 膜片鉗實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Gln49-PLA2對(duì)SHSY5Y細(xì)胞鈉離子通道無(wú)明顯作用，但可減弱鉀離子通道