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文檔簡介
1、【背景和目的】:骨髓間質干細胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)因具有很強的分裂、增殖及自我更新能力,傳統(tǒng)上認為MSCs可分化為肌細胞、骨細胞、血細胞等組織細胞。近年來研究發(fā)現(xiàn)MSCs在一定的條件下可橫向分化為神經細胞,如在有絲分裂因子、維甲酸類化合物、神經營養(yǎng)因子、中藥等誘導下。唐氏綜合癥細胞粘附分子(Down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)的基因位于
2、21q22,其過量表達,如21號染色體的三體化,即唐氏綜合癥(Downsyndrome),造成神經細胞遷移、增殖、分化的異常,最終導致先天性智能發(fā)育障礙。若DSCAM表達降低則出現(xiàn)神經連接異常機會增加。而且,DSCAM是神經細胞連接中必須的細胞粘附分子,在軸突和樹突的生長、突觸的形成、對神經網絡的形成和維持有重要作用。研究唐氏綜合癥細胞粘附分子(DSCAM)在大鼠骨髓間質干細胞(MSCs)分化為神經細胞中的作用。
【方法】:在
3、建立黃芩苷誘導大鼠MSCs分化為神經細胞的基礎上,采用免疫細胞化學法、Western Blot法等檢測DSCAM的表達變化;同時采用RNA干擾技術,觀察DSCAM-siRNA轉染MSCs后誘導分化情況。
【結果】:誘導前大鼠MSCs不表達DSCAM:預誘導24h:MSCs開始少量表達DSCAM(1.71%±0.67%);黃芩苷誘導6h,部分表達DSCAM(15.79%±4.24%);誘導后3d,DSCAM表達最高(53.16%
4、±5.94%);誘導6d,DSCAM表達明顯下降(28.99%±6.72%)。DSCAM-siRNA轉染MSCs,DSCAM表達顯著下降。而且,誘導前MSCs不表達神經細胞特異性標記蛋白β-Ⅲ-tubulin;誘導6h,β-Ⅲ-tubulin表達為(1.40%±0.79%)。誘導3d達到(41.59%±3.17%);誘導6d,β-Ⅲ-tubulin表達為(59.11%±4.76%)。但是,DSCAM-siRNA轉染MSCs,誘導3d、6
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