氫醌對體外培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細胞核轉(zhuǎn)錄因子表達的影響.pdf

1、目的：1.進行骨髓基質(zhì)細胞的體外傳代培養(yǎng)，觀測其生物學性能；2.研究氫醌對激活劑佛波酯(PMA)導致的骨髓基質(zhì)細胞核轉(zhuǎn)錄因子表達的影響，并初步探討基質(zhì)細胞中NF-κB表達抑制在苯的血液學毒性中所起的作用。 方法：本實驗為體外實驗，分兩部分完成，第一部分：骨髓基質(zhì)細胞培養(yǎng)及其生物學特性觀測。從志愿者抽取并分離得到骨髓基質(zhì)細胞，進行體外細胞培養(yǎng)，動態(tài)觀察細胞的形態(tài)學變化，流式細胞儀進行細胞計數(shù)和細胞周期檢測，繪制細胞生長曲線；第二部

2、分：將細胞轉(zhuǎn)移入六孔培養(yǎng)板，調(diào)整每孔細胞密度為1.0×105/m1,氫醌用四種濃度水平0.1μM，1μM，10μM，100μM分別處理骨髓基質(zhì)細胞并立即加入細胞激活劑PMA，每組設立空白對照，并用NF-κB抑制劑PDTC作陽性對照，臺盼蘭染色，比較各組細胞活力的變化，用臺盼蘭拒染率表示結果。細胞免疫組化，DAB染色后鏡下觀察氫醌未暴露和暴露后P65蛋白位置和活性的改變；然后分別在處理后0h.12h.24h.72h提取核蛋白，TransA