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文檔簡介
1、目的:研究生長抑素思他寧在體外對胃癌細胞株SGC-7901生長抑制作用,探討其作用機制。 方法:使用生長抑素思他寧溶液,按不同濃度(10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)處理對數(shù)生長期的胃癌細胞株SGC-7901,倒置顯微鏡觀察細胞生長情況。MTT比色法測量吸光度A值,計算對照組和各實驗組細胞的生長抑制率;流式細胞儀對思他寧作用后的SGC-7901細胞進行細胞周期分
2、析,計算細胞凋亡率:免疫細胞化學(xué)(SP)法檢測腫瘤細胞中VEGF、NFkB蛋白的表達變化;RT-PCR半定量檢測SGC-7901細胞VEGF、NFkB mRNA的表達水平。 結(jié)果 MTT比色法顯示思他寧對SGC-7901細胞生長有明顯抑制作用,并且隨著濃度的增加和作用時間延長而增強,思他寧濃度為10-6mol/L的抑制率最大,約為61.76%;根據(jù)流式細胞儀定量分析顯示,濃度為10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mo
3、l/L的思他寧誘導(dǎo)SGC-7901細胞產(chǎn)生的凋亡率分別為15.23%、26.3%、51.27%,與對照組2.28%的凋亡率比較均有顯著差異(P<0.05)。思他寧可誘導(dǎo)SGC-7901細胞G0/G1,期阻滯,使處于S期的腫瘤細胞逐漸減少,且隨著濃度增加作用增強;免疫細胞化學(xué)(SP)結(jié)果顯示,隨著不同濃度的思他寧處理48小時后,SGC-7901細胞表達棕黃色顆粒的陽性細胞數(shù)減少,染色逐漸變淡。而對照組細胞的VEGF和NFκB蛋白高表達,胞
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