新西蘭兔OSAHS模型建立及舌下神經傳導性的研究.pdf

1、研究背景及目的：
　　 建立穩(wěn)定、可靠的阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征動物模型，是研究該疾病發(fā)生、發(fā)展的前提和重要手段，現在國內外對睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（obstructive sleep apnea-hyperpnoea syndrome, OSAHS）的動物模型還有待探索研究，這是因為OSAHS發(fā)病機制十分復雜，同時最易發(fā)生阻塞的舌咽區(qū)解剖形態(tài)復雜多變，局部氣道形態(tài)與睡眠時相和體位、上氣道開放肌群神經肌肉功能狀態(tài)、中樞呼

2、吸驅動和調控等相關，很難從病因學、形態(tài)學上獲得模擬。
　　 目前國內外主要的建模方法有兩種：第一種針對大動物，切開氣管，植入瓣膜，控制瓣膜的開放。該方法的主要缺陷是易導致下呼吸道的梗阻，動物建模的死亡率很高；第二種針對小動物，用低壓氧艙給以缺氧環(huán)境，這只能模擬OSAHS的血氧飽和度的變化，建立全身間歇性缺氧的動物模型，建立的不是阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣模型；還有學者希望找到天然的OSAHS動物，比如英國的牛頭犬和中國的陸川豬都是

3、天然的OSAHS動物，但是這些出生就發(fā)生睡眠呼吸暫停的動物在正常的日間活動中也存在呼吸暫停，它們自身是否存在特殊的代償機制也尚未被證實。
　　 二甲基硅油是一種具有很強生物安全性的凝膠狀物質，我們設想通在CT輔助導航下行動物舌咽氣道旁的間隙注射此種凝膠，造成上氣道狹窄。形成睡眠呼吸暫?；虻屯饩C合征的OSAHS的動物模型。
　　 在OSAHS的疾病發(fā)展過程中，始終伴隨著神經功能的改變。舌下神經及頦舌肌作為維持上氣道開放的

4、神經肌肉，它們在OSAHS的發(fā)生發(fā)展中存在著損傷的病理變化，損傷又將導致OSAHS的進一步的嚴重，由于本實驗的局部注射藥物生物安全性高；注射方法對神經的損傷較小，在本實驗中我們有安全性研究部分，所以能排除手術注射凝膠及手術方法對神經的損傷。OSAHS會造成上氣道開放肌的病理和功能改變已經被國內外研究證實，但是否會造成舌下神經病理生理改變尚有待研究，我們在實驗中對實驗組和對照組進行舌下神經的病理生理、傳導能力進行對比分析，其中傳導能力包括

5、傳導速度、潛伏期、傳導波幅。期望通過第一、二、三、四周的對比研究，連續(xù)的觀察OSAHS兔的舌下神經的變化。
　　 研究方法：
　　 1．新西蘭長耳兔10只，分為實驗組5只，對照組5只。實驗前10只兔子行多導睡眠儀檢測，檢測項目：腦電圖、心電圖、鼾聲、口鼻氣流、血氧飽和度。實驗組CT輔助下行上氣道周圍間隙二甲基硅油凝膠注射，使用20ml大針筒從兔下頜角內側0.5cm處進針，進針方向向前向內，直達舌咽水平，注意CT定位，回抽

6、無血無氣體，即可每側2.0ml凝膠，飼養(yǎng)一個月，期間術后即刻、2周后、一月后復查多導睡眠圖。主要以平均血氧飽和度下降４％以下且AHI指數超過10為主要的建模成功標準。
　　 2．通過上述方法建模成功后，每隔一周舌下神經傳導能力檢查，檢測包括實驗組和對照組，每次電生理檢測結束后處死動物，電生理檢測使用肌電圖儀，檢測內容包括對照組和實驗組舌下神經的傳導速度、潛伏期、傳導振幅。處死動物后取舌下神經行HE染色觀察神經的病理變化。對照組行

7、相同處理。
　　 3．在術前、術后一周、術后一月取二甲基硅油附近區(qū)域的舌下神經行HE病理切片檢查，觀察神經的不同時間段的變化，是否存在急性炎癥反應，同時觀察局部粘膜的反應，一月時注意觀察兔子是否存在躁狂等行為異常。
　　 結果：
　　 1. 手術后及1月后復查多導睡眠圖，實驗組與術前自身、對照組相比有明顯的睡眠呼吸暫停，AHI指數術前平均為2，術后兩周達18，術后一月達22；平均血氧飽和度明顯下降，術前維持在98

8、％左右，術后兩周為88％左右，術后一月為87％左右。（p<0.05），CT檢查結果：在上氣道周圍，咽旁間隙內見團塊狀密度增高影像，環(huán)狀軟骨區(qū)域氣道面積明顯減小。
　　 2．舌下神經一周內無明顯變化，自第三周后出現神經脫髓鞘變化，并逐漸加重。在傳導性能方面，舌下神經傳導速度變慢；潛伏期延長；振幅強度逐漸減弱，其中神經的傳導速度一月后下降約50％，潛伏期延長約1.5倍，振幅下降約50％。
　　 3．對二甲基硅油凝膠的安全性檢

9、測，取術前的新西蘭兔和注射手術后一周實驗組動物的舌下神經行病理切片檢查，采用HE染色法。觀察發(fā)現術后一周是凝膠附近的神經未見明顯組織水腫和炎癥細胞產生。在動物解剖時，我們觀察到凝膠組織硬化，質地堅韌，但與周圍組織未見界限尚清楚，動物舌咽區(qū)的間隙內無組織壞死。
　　 結論：
　　 1. 二甲基硅油口外注射法建立的新西蘭兔子阻塞性睡眠呼吸暫停模型可靠、操作性好，與上氣道阻塞狀態(tài)接近，可進行動態(tài)的研究，可廣泛應用于睡眠呼吸暫停