125I粒子植入對(duì)人纖維肉瘤裸鼠模型微血管生成的影響.pdf

1、纖維肉瘤發(fā)病率較低,但嚴(yán)重危害人類健康。目前治療主要是以手術(shù)切除為主,放、化療結(jié)合的綜合治療,由于手術(shù)單純切除復(fù)發(fā)率高、外放療劑量受周邊正常組織限制、化療敏感性差,影響了患者預(yù)后。放射性125I粒子近距離放療通過將微型放射源植入腫瘤內(nèi)或受腫瘤侵犯組織中,持續(xù)釋放低能量γ射線殺傷腫瘤組織。和普通外放療相比具有高度適形、局部高劑量、周邊損傷小的優(yōu)勢(shì)。在軟組織肉瘤治療中已有小范圍臨床應(yīng)用,但對(duì)治療機(jī)理缺少相關(guān)基礎(chǔ)研究。腫瘤微血管生成不僅是腫瘤

2、可持續(xù)生長(zhǎng)的基礎(chǔ),也為其侵襲和轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了條件。國內(nèi)外已有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞通過分泌和激活血管生長(zhǎng)因子促進(jìn)新生血管生成,但纖維肉瘤中促血管生成因子表達(dá)水平鮮見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過建立人纖維肉瘤裸鼠移植瘤模型,檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、微血管密度(microvessel density,MVD)在人纖維肉瘤內(nèi)表達(dá)水平,觀察125I粒子植入早期的抑瘤效果、纖維肉瘤細(xì)胞及微

3、血管病理損傷程度及VEGF、MVD表達(dá)改變,探討125I粒子植入對(duì)人纖維肉瘤微血管生成的早期影響。
　　 目的:檢測(cè)人纖維肉瘤血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)及微血管生成情況,探討125I粒子近距離放療抑制人纖維肉瘤裸鼠皮下移植瘤微血管形成原因及不同活度125I粒子對(duì)纖維肉瘤微血管生長(zhǎng)的影響。方法:建立人纖維肉瘤細(xì)胞(HT-1080)裸鼠皮下移植瘤模型,選擇腫瘤直徑(10±1)mm、形態(tài)較規(guī)則的存活荷瘤裸鼠24只,按隨機(jī)數(shù)字表法分4組,實(shí)驗(yàn)

4、組A、B、C分別植入單顆活度為14.8MBq、22.2MBq、29.6MBq的125I粒子,對(duì)照組D植入單顆空源。粒子植入后15d完整切除腫瘤,用游標(biāo)卡尺測(cè)量裸鼠移植瘤的長(zhǎng)徑(a)及寬徑(b),按照V=ab2×0.52的公式計(jì)算腫瘤體積(mm3),按下列公式計(jì)算腫瘤體積抑制率:(IR)=(對(duì)照組平均腫瘤體積-實(shí)驗(yàn)組平均腫瘤體積)/對(duì)照組平均腫瘤體積×100％,分析各組差異有無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在瘤體最大剖面上取材,沿粒子長(zhǎng)軸切面各選取四組切片

5、,光鏡觀察各組的腫瘤細(xì)胞及微血管病理組織學(xué)。根據(jù)2002年Wheeler等的直腸癌消退分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[1](Rectal CancerRegression Grade,RCRG)評(píng)價(jià)組織學(xué)病理反應(yīng)。免疫組化檢測(cè)移植瘤微血管結(jié)構(gòu)的變化及VEGF的表達(dá),比較CD105標(biāo)記的各組MVD。
　　 結(jié)果:
　　 1.成功建立人纖維肉瘤裸鼠移植瘤模型。粒子植入后15d,A、B、C、D組的平均腫瘤體積分別為:(879.32±54.904)m

6、m3、(186.91±32.70)mm3、(122.01±34.72)mm3和(1302.71±62.39)mm3。各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=844.21,P=0.000)。125I粒子對(duì)A、B、C組腫瘤體積抑制率分別為32.50％、85.65％和90.63％。
　　 2.與對(duì)照組D比較,實(shí)驗(yàn)組A、B、C可見移植瘤細(xì)胞壞死,微血管不同程度減少,內(nèi)皮細(xì)胞殺傷明顯。各組出現(xiàn)不同級(jí)別病理組織學(xué)反應(yīng)。其中AB組比較,F=8.80 P=

7、0.036＜0.05,AC組比較,F=3.375 P=0.012＜0.05,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AD、BC組間比較,F分別為3.37、0.00,P分別為0.066、1.00,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.人纖維肉瘤裸鼠移植瘤中VEGF陽性率約66.7％。四組VEGF表達(dá)陽性率分別為54.2％(13/24)、29.20/,(7/24)、20.8％(5/24)、66.7％(16/24),A、D組間VEGF表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=

8、0.784 P=0.376),B、C組的VEGF表達(dá)均顯著低于D組,X2分別為6.761,10.243,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001＜0.05)。
　　 4.A、B、C、D組MVD表達(dá)分別為27.49±3.10、10.27±3.57、9.14±2.49、30.15±4.26,A、D組間MVD表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=3.814P=0.259)。B、C組的MVD表達(dá)均顯著低于D組,F分別為28.502、30.123,差異有統(tǒng)計(jì)