咖啡酸在大鼠體內Ⅱ相代謝產物研究.pdf

1、咖啡酸(Caffdc acid,CA),化學名為:3-(3,4-二羥苯基)-2-丙烯酸,屬于酚酸類化合物,廣泛分布于小薊、金銀花、杜仲、牛至、茵陳、蒲公英等多種藥用植物中?，F(xiàn)代藥理學研究表明咖啡酸具有廣泛的生物活性,如降血壓、降血糖、抗病毒、抗氧化等?？Х人岬纳锘钚砸蕾囉谄湓隗w內的吸收和代謝,然而國內外關于咖啡酸的代謝研究報道較少,僅有一些關于咖啡酸在大鼠體內藥代動力學及用離體灌流模型評價其體內代謝方面的研究報道。為了進一步揭示咖啡酸

2、在大鼠體內的代謝轉化情況及代謝規(guī)律,并為其體內藥效物質基礎和新藥開發(fā)提供依據(jù),本文對咖啡酸在大鼠內的代謝產物進行了深入的研究。
　　 我們首先采用液相色譜串聯(lián)質譜(LC/MS/MS)法測定大鼠灌胃給予咖啡酸(100 mg.kg-1)后血漿和尿樣中咖啡酸的Ⅱ相代謝產物,通過分子離子峰及碎片峰對其結構進行推測,推斷出大鼠血漿中的咖啡酸Ⅱ相代謝物有四個,分別為:兩個咖啡酸葡萄糖醛酸結合物和兩個咖啡酸硫酸結合物；推斷出大鼠尿樣中咖啡酸Ⅱ

3、相代謝產物有八個,分別為:兩個咖啡酸甲基化物(阿魏酸和異阿魏酸)、兩個咖啡酸葡萄糖醛酸結合物、兩個咖啡酸硫酸結合物、阿魏酸葡萄糖醛酸結合物及其硫酸結合物、異阿魏酸葡萄糖醛酸結合物及其硫酸結合物。然后對灌胃給予咖啡酸溶液的大鼠尿樣進行富集,以LC/MS/MS檢測咖啡酸Ⅱ相代謝產物,采用大孔吸附樹脂、ODS開放柱層析、凝膠柱層析色譜,制備高效液相色譜等方法對其進行分離純化,結果從大鼠尿樣中分離得到六個咖啡酸代謝產物,經 LR、MS、1H-N

4、MR.、13C-NMR、HMBC、HSQC等波譜手段鑒定了其中五個Ⅱ相代謝產物的結構,分別為咖啡酸-3-O-βD-葡萄糖醛酸苷(Caffeicacid-3-o-β-D-glucuromde)、咖啡酸-4-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(Caffeicacid-4-O-D-glucuronide)、咖啡酸-3-O-硫酸酯(Caffeic acid-3-O-sulfate)、咖啡酸-4-O-硫酸酯(Caffeic acid-4-O-sulfate

5、),阿魏酸(ferulic acid)。以上五個咖啡酸的Ⅱ相代謝產物首次從大鼠尿液中分離獲得并對其結構進行了鑒定。
　　 本文首次對咖啡酸的Ⅱ相代謝產物進行了系統(tǒng)研究,結果證實咖啡酸在大鼠體內代謝廣泛,通過對咖啡酸的Ⅱ相代謝產物進行結構鑒定,發(fā)現(xiàn)咖啡酸葡萄糖醛酸結合物是咖啡酸在大鼠體內主要的Ⅱ相代謝產物。本研究分離得到的Ⅱ相代謝產物為咖啡酸在大鼠體內的定性定量研究提供了對照品,同時為闡明咖啡酸在大鼠體內代謝規(guī)律及新藥開發(fā)提供了理