兔雙側(cè)椎動脈頸段完全阻斷后頸髓血流和功能變化的實驗研究.pdf

1、目的:椎動脈損傷常見于頸部外傷、手術(shù)損傷等,椎動脈損傷后,其臨床癥狀易與腦外傷相混淆,普通影像學(xué)上又無特殊表現(xiàn),因此極易被漏診.目前,椎動脈損傷引起頸髓缺血的程度尚無定論,但在臨床工作中,雙側(cè)椎動脈損傷后,患者可出現(xiàn)較高的死亡率.頸髓、脊神經(jīng)根血流量的90﹪由椎動脈供給<'[1]>,故椎動脈損傷越來越引起了人們的重視.該文構(gòu)建兔雙側(cè)椎動脈頸段完全阻斷這一動物模型,觀測雙側(cè)椎動脈阻斷前、后頸髓血流量的變化,了解椎動脈損傷對頸髓血供的影響,

2、觀察雙側(cè)椎動脈阻斷前、后誘發(fā)電位的變化,以此了解椎動脈損傷與頸髓功能變化的關(guān)系.方法:通過手術(shù)結(jié)扎兔雙側(cè)椎動脈頸段來實現(xiàn)雙側(cè)椎動脈完全阻斷,建立兔雙側(cè)椎動脈損傷動物模型,使用LDF(Laser Doppler Flowmetry,激光多普勒血流測定儀)觀測雙側(cè)椎動脈阻斷前、后頸髓的血流改變;用誘發(fā)電位的變化來反映雙側(cè)椎動脈阻斷前、后頸髓功能的改變;應(yīng)用HE(Hematoxylin and eosin)染色和電鏡技術(shù)觀察雙側(cè)椎動脈阻斷前、

3、后頸髓組織病理學(xué)改變;并借助免疫組化技術(shù)檢測C-FOS(即早反應(yīng)基因)、BCL-2(B-cell lymphoma emia-2 gene,B細胞淋巴瘤白血病2基因)、NSE (Neuron specific enolase,神經(jīng)元特異性烯醇酶)在兔雙側(cè)椎動脈完全阻斷前、后頸髓組織中的表達情況.結(jié)果:1. 兔雙側(cè)椎動脈完全阻斷4小時后,頸髓血流下降最明顯,8小時后,頸髓血流較前有所恢復(fù)但仍明顯低于正常,24小時后,頸髓血流有所恢復(fù),但還

4、未達到正常水平,7天后,頸髓血流接近正常血流值, 56天后頸髓血流恢復(fù)接近正常水平,與NC組 (normal control group)相比,無明顯差異(P>0.05);2. 兔雙側(cè)椎動脈完全阻斷4小時后,誘發(fā)電位與NC組兔相比,無明顯改變(P>0.05),8小時后,誘發(fā)電位潛伏時有所延長、振幅有所縮短,與4小時相比,這種變化較明顯(P<0.05),24小時后,誘發(fā)電位潛伏時和振幅與8小時相比,無明顯變化(P>0.05),7天后,誘發(fā)

5、電位潛伏時和振幅基本恢復(fù)接近正常水平(P>0.05),56天后,誘發(fā)電位潛伏時和振幅與NC組兔相比,二者間無明顯差異(P>0.05);3. C-FOS和BCL-2免疫組化表達變化趨勢相似:在兔雙側(cè)椎動脈阻斷后4小時,它們表達最強烈,8小時后,表達雖然較強,但較4小時有所下降,24小時,表達基本接近正常水平,7天及56天后,這二者均呈正常表達.4. 兔雙側(cè)椎動脈完全阻斷4小時后,頸髓組織NSE免疫組化呈弱陽性表達,8小時后,NSE表達明顯

6、增強,24小時后,NSE表達強度跟8小時無顯著變化(P>0.05),7天后或56天后,NSE又呈弱陽性表達.HE染色、電鏡檢查結(jié)果示:4小時,頸髓組織無明顯病理改變,8小時和24小時后呈現(xiàn)缺血性損傷,7天或56天后,頸髓組織結(jié)構(gòu)正常,無病理學(xué)改變.結(jié)論:兔雙側(cè)椎動脈完全阻斷后,頸髓血流在短期內(nèi)明顯下降,通過代償機制,頸髓血流逐漸恢復(fù),最終接近正常水平;與此同時,頸髓組織出現(xiàn)缺血性損傷,引起誘發(fā)電位的潛伏時和振幅一定程度改變;BCL-2、