活性維生素D3對阿霉素誘導的足細胞轉(zhuǎn)分化的干預作用.pdf

1、目的：探討活性維生素D3對阿霉素誘導的足細胞上皮-間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化的干預作用
　　方法：以體外培養(yǎng)的小鼠足細胞系為研究對象，分六組進行實驗：正常組（C組）、阿霉素組（即模型組，ADR組，0.5μg/ml）、低劑量活性維生素D3組（LVD組，1nmol/L）、高劑量活性維生素D3組（HVD組，10nmol/L）、纈沙坦組（ARB組，10μmol/L）、纈沙坦＋高劑量活性維生素D3組（AHVD組）。各實驗組干預24h、48h后通過MT

2、T法檢測各組足細胞的增殖；通過流式細胞術(shù)檢測各組足細胞的凋亡率，同時24h、48h后通過RT-PCR測synaptopodin、P-cadherin、desmin、FSP-1、TGF-β、β-catenin mRNA的表達。Western Bolt檢測各組干預24h、48h后synaptopodin、P-cadherin、desmin、β-catenin蛋白的表達。
　　結(jié)果：1、MTT結(jié)果顯示：24h及48hADR組足細胞增殖能

3、力明顯下降﹙P＜0.01﹚；與ADR組相比，24h及48h LVD組、HVD組、ARB組、AHVD組細胞增殖能力增加﹙P＜0.01﹚。
　　2、24h及48h后，ADR組synaptopodin mRNA及蛋白表達均下降﹙P＜0.01﹚。24h時與ADR組相比，ARB組、LVD組、HVD組、AHVD組synaptopodin mRNA表達均升高（P＜0.01），四個藥物干預組之間無顯著差異。48h時與ADR組相比， LVD組及HV

4、D組synaptopodin mRNA及蛋白表達均升高（P<0.05）。然而與ADR組相比，24h及48hARB組synaptopodin蛋白表達均下降（P＜0.01）。24h及48h后，ADR組P-cadherin mRNA及蛋白表達均下降﹙P＜0.01﹚；與ADR組相比， ARB組、LVD組、HVD組P-cadherin mRNA及蛋白表達均升高（P＜0.05），但是未上調(diào)至正常水平。AHVD組在24h蛋白水平上未達顯著差異（P>0

5、.05）。
　　3、24h及48h后，ADR組desmin mRNA及蛋白表達上調(diào)（P＜0.01）。與ADR組相比，24h及48hLVD組、HVD組、ARB組、AHVD組desmin mRNA及蛋白表達均下調(diào)﹙P＜0.01﹚。24h時與正常對照組相比，ADR組FSP-1 mRNA表達上調(diào)﹙P＜0.01﹚；與ADR組相比，LVD組、HVD組、ARB組、AHVD組FSP-1 mRNA表達均下調(diào)﹙P＜0.01﹚。48h時與正常對照組相比

6、，ADR組FSP-1 mRNA表達略有上調(diào)，但未達統(tǒng)計學意義；與ADR組相比，LVD組、HVD組、AHVD組FSP-1 mRNA表達均有所下調(diào)﹙P＜0.05﹚。
　　4、24h及48h后，ADR組足細胞β-catenin mRNA及蛋白表達均上調(diào)﹙P＜0.01﹚。與ADR組相比，LVD組、HVD組、ARB組、AHVD組β-catenin mRNA及蛋白表達均下調(diào)﹙P＜0.05﹚。24h時與正常對照組相比，ADR組TGF-βmRNA

7、表達上調(diào)﹙P＜0.01﹚；與ADR組相比，ARB組、LVD組、HVD組、AHVD組TGF-βmRNA表達明顯下調(diào)﹙P＜0.01﹚。48h時與正常對照組相比，ADR組TGF-βmRNA表達上調(diào)﹙P＜0.01﹚；與ADR組相比，HVD組與AHVD組TGF-βmRNA表達明顯下調(diào)﹙P＜0.01），其他兩組無顯著差異。
　　結(jié)論：1、阿霉素可誘導足細胞發(fā)生EMT，建立體外小鼠足細胞EMT模型。
　　2、活性維生素D3可通過修復足細胞