靈龜八法對(duì)陽(yáng)虛大鼠下丘腦NO、NOS影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：陽(yáng)虛證的患者在臨床上并不在少數(shù)，許多患者主要是依靠傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的治療方法來(lái)調(diào)整和治療，尤其是中醫(yī)外治療法如艾灸法等。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)將機(jī)體由于陽(yáng)氣不足、陰陽(yáng)失衡、正不勝邪而出現(xiàn)的某些機(jī)體功能衰退或者紊亂的病理狀態(tài)稱之為陽(yáng)虛。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)經(jīng)過(guò)大量臨床與實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)陽(yáng)虛證與機(jī)體神經(jīng)內(nèi)分泌免疫系統(tǒng)（NEIS）相關(guān)。研究表明，當(dāng)機(jī)體處于腎陽(yáng)虛證時(shí)狀態(tài)時(shí)，機(jī)體下丘腦-垂體-靶腺軸中的某個(gè)環(huán)節(jié)或某幾個(gè)環(huán)節(jié)會(huì)出現(xiàn)一定程度的功能衰退或紊亂，與此同時(shí)還發(fā)現(xiàn)這種功能

2、的異常大部分與下丘腦（或更高級(jí)）對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)功能有關(guān)，這說(shuō)明陽(yáng)虛證與機(jī)體的免疫系統(tǒng)有著密切的關(guān)系。
　　大量研究表明，一氧化氮（NO）作為一種信號(hào)遞質(zhì)與下丘腦-垂體-靶腺軸之間的聯(lián)系密不可分，在N0和激素互相調(diào)節(jié)的作用機(jī)制下，整個(gè)軸的功能得以平衡穩(wěn)定，這表明NO對(duì)下丘腦、垂體、腎上腺和性腺分泌具有調(diào)控作用。因此有實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，陽(yáng)虛證時(shí)若NO水平得以改善可以對(duì)下丘腦-垂體-靶腺軸進(jìn)行良性的調(diào)節(jié)，從而對(duì)陽(yáng)虛證起到有效的治療。許多臨

3、床實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)研究表明，灸法對(duì)機(jī)體由于免疫系統(tǒng)功能的衰退或者紊亂而引起的病理改變有著確切的治療作用。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)針灸的研究深入，灸法的作用機(jī)制被逐步了解，其中灸法良性的調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能，特別是對(duì)“陽(yáng)虛證”免疫功能調(diào)節(jié)影響的研究越來(lái)越被關(guān)注，通過(guò)大量的臨床觀察和實(shí)驗(yàn)研究，灸法能夠增強(qiáng)機(jī)體特異性和非特異性免疫功能這一觀點(diǎn)得到了學(xué)術(shù)界普遍的認(rèn)同。
　　本課題將陽(yáng)虛大鼠動(dòng)物模型作為研究對(duì)象，采用靈龜八法開穴灸，靈龜八法開穴灸結(jié)合足三里穴、

4、腎俞穴溫和灸，足三里穴、腎俞穴溫和灸三種不同的治療方法進(jìn)行治療并將治療后結(jié)果做對(duì)比研究，觀察三種療法對(duì)受試大鼠的下丘腦NO含量和一氧化氮合酶（NOS）活性的影響，探討靈龜八法開穴灸調(diào)節(jié)陽(yáng)虛大鼠動(dòng)物模型免疫系統(tǒng)功能的作用機(jī)理，為臨床運(yùn)用靈龜八法開穴灸防治以免疫系統(tǒng)功能衰退或紊亂為實(shí)質(zhì)的陽(yáng)虛證提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　選用體重為230-280克的SD大鼠50只，雌雄兼用，分籠飼養(yǎng)。參考陽(yáng)虛大鼠動(dòng)物模型建立的相關(guān)文獻(xiàn)后，隨機(jī)抓取其中40只 S

5、D大鼠，每天對(duì)其中的每一只受試大鼠按照每100克體重3毫克醋酸潑尼松龍注射液(AHP)的比例進(jìn)行肌肉注射，連續(xù)注射5天，接受注射的大鼠出現(xiàn)四肢及尾巴冰冷、拱背畏寒、蜷縮在一起、反應(yīng)遲鈍、形體消瘦、食欲不振、精神萎靡、便溏、體毛疏松無(wú)光澤甚者脫毛等虛損臨床表現(xiàn)。這些受試大鼠的臨床表現(xiàn)與中醫(yī)對(duì)陽(yáng)虛狀態(tài)的辨別標(biāo)準(zhǔn)極為相似，這說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)所需的陽(yáng)虛大鼠動(dòng)物模型造模成功。
　　造模成功后，隨機(jī)將陽(yáng)虛模型大鼠分為五組，A組：不予治療的陽(yáng)虛模型大

6、鼠即陽(yáng)性空白對(duì)照組，B組：對(duì)受試大鼠采用足三里穴、腎俞穴溫和灸治療即足三里穴、腎俞穴溫和灸組，C組：對(duì)受試大鼠采用靈龜八法開穴灸治療即靈龜八法開穴灸組，D組：對(duì)受試大鼠采用靈龜八法開穴灸結(jié)合足三里穴、腎俞穴溫和灸治療即靈龜八法開穴灸結(jié)合足三里穴、腎俞穴溫和灸組，剩余10只未經(jīng)造模的正常大鼠為E組即視為陰性空白對(duì)照組。5組同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其中B、C、D三組進(jìn)行治療，連續(xù)兩周在每日上午九點(diǎn)按照各組特定的治療方法對(duì)B、C、D組受試大鼠進(jìn)行治療，

7、對(duì)所取的每個(gè)穴位進(jìn)行灸法操作15min，左右兩側(cè)穴位交替施術(shù)。A、E兩組受試大鼠只抓取，不做治療。
　　在治療療程即兩周治療時(shí)間結(jié)束后對(duì)所有實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行取樣檢測(cè)，通過(guò)與A、E兩組比較，分別觀察B、C、D三組不同的治療方法對(duì)陽(yáng)虛模型大鼠下丘腦NO含量和NOS活性變化的影響，并采用SPSS（Statistical Product and Service Solutions，SPSS）19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析，比較足三里穴、

8、腎俞穴溫和灸，靈龜八法開穴灸，靈龜八法開穴灸結(jié)合足三里穴、腎俞穴溫和灸，三種治療方法對(duì)陽(yáng)虛模型大鼠下丘腦NO含量和NOS活性變化方面是否有統(tǒng)計(jì)意義上的差異。
　　結(jié)果：
　　1．B、C、D組陽(yáng)虛模型大鼠經(jīng)過(guò)治療后與 A組陽(yáng)虛模型大鼠未治療組比較。三組均能降低大鼠下丘腦NO的含量（P<0.01）；D組與B、C組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），而D組與正常組（E組）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），因此表明靈龜八

9、法開穴灸結(jié)合足三里穴、腎俞穴溫和灸可以更好的降低大鼠下丘腦NO含量，從而對(duì)陽(yáng)虛型大鼠起到更佳的治療作用。
　　2.B、C組陽(yáng)虛模型大鼠經(jīng)過(guò)治療后與A組陽(yáng)虛模型大鼠未治療組比較，能降低陽(yáng)虛模型大鼠下丘腦NOS活性（P<0.05）；D組陽(yáng)虛模型大鼠經(jīng)過(guò)治療后與A組陽(yáng)虛模型大鼠未治療組比較，能顯著的降低陽(yáng)虛模型大鼠下丘腦NOS活性（P<0.01），與此同時(shí)D組與正常組（E組）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。因此表明靈龜八法開穴灸