Tim-3表達(dá)于人外周血單個(gè)核細(xì)胞的多個(gè)細(xì)胞亞群且在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎.pdf

1、T細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋白-3 (T cell immunoglobulin mucin-3，Tim-3)最初被發(fā)現(xiàn)為Th1細(xì)胞的特異性表面標(biāo)志，目前已在小鼠和人的多個(gè)細(xì)胞亞群檢測(cè)到它的逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。它在T細(xì)胞活化后表達(dá)上調(diào)，通過抑制細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞增殖來調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫平衡。它的失調(diào)參與多種自身免疫病的發(fā)病。但這些發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)來源于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，和Tim-3逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的檢測(cè)。我們?cè)谇捌谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）患者CD4+T細(xì)胞中Tim-

2、3 mRNA的表達(dá)異常增多。本課題從蛋白水平對(duì)Tim-3在人PBMC不同細(xì)胞亞群的表達(dá)情況，以及在RA患者CD4+T細(xì)胞不同亞群的表達(dá)變化做了進(jìn)一步研究。
　　 目的：觀察Tim-3在人PBMC不同細(xì)胞亞群及活化的CD4+T細(xì)胞的表達(dá)情況。觀察Tim-3在RA患者外周血CD4+T細(xì)胞不同亞群的表達(dá)變化。探討Tim-3與CD4＋T細(xì)胞功能的關(guān)系，及其在RA發(fā)病中的作用。
　　 方法：FACS檢測(cè)6例健康人外周血CD4＋T細(xì)

3、胞、CD8＋T細(xì)胞、CD19＋B細(xì)胞、CD14＋單核細(xì)胞、CD3－CD56＋NK細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)。MACS分選7例健康人和7例RA患者外周血CD4+T細(xì)胞，PMA、Ionomycin多克隆刺激體外培養(yǎng)48h，F(xiàn)ACS檢測(cè)Tim-3和Th1型細(xì)胞因子IFN-γ、Th2型細(xì)胞因子IL-4的表達(dá)。
　　 結(jié)果：⑴Tim-3在人PBMC多個(gè)細(xì)胞亞群的表達(dá)：在人外周血淋巴細(xì)胞中，Tim-3＋細(xì)胞主要為NK細(xì)胞，其次為CD8+T細(xì)胞和

4、CD4+T細(xì)胞；除CD4+T細(xì)胞（1.03%±0. 54%）外，CD8+T細(xì)胞(1.58%±0. 47%）、NK細(xì)胞(11.00%±4.10%)、單核細(xì)胞（21.51%±7.99%)中均有一定比例的細(xì)胞表達(dá)Tim-3；其中單核細(xì)胞表達(dá)Tim-3的比例較其它亞群高（21.51%±7.99% vs 1.03%±0. 54%，1.58%±0. 47%，11.00%±4.10%，P＜0.05）。⑵Tim-3在人外周血CD4+T細(xì)胞的表達(dá)：CD4

5、＋T細(xì)胞經(jīng)非特異刺激活化后，表達(dá)Tim-3的比例升高(2.27%±0.62% vs 1.03%±0.54%，P<0.05)；人外周血CD4+T細(xì)胞中，Tim-3＋細(xì)胞僅有17.34%±9.06%為Th1細(xì)胞，1.26%±2.18%為Th2細(xì)胞，提示CD4+T細(xì)胞的其它亞群可能表達(dá)Tim-3；活化的CD4+T細(xì)胞中，IFN-γ＋細(xì)胞表達(dá)Tim-3的比例較IFN-γ-細(xì)胞高(7.67%±4.63% vs 2.08%±0.69%，P<0.01

6、)。⑶Tim-3在RA患者外周血CD4＋T細(xì)胞的表達(dá)變化：RA患者CD4＋T細(xì)胞表達(dá)Tim-3的比例較對(duì)照組升高（5. 34%±3.83% vs 0.62%±0.69%，P<0.01）；RA患者Th1細(xì)胞表達(dá)Tim-3的比例較對(duì)照組升高（17.74%±9.40% vs 7.67%±4.63%，P<0.01）；RA患者Tim-3+IFN-γ-CD4+T細(xì)胞表達(dá)Tim-3的量較對(duì)照組減少（1602.71±843.67 vs 3777.14±

7、2399.37，P<0.05）。
　　 結(jié)論：除CD4+T細(xì)胞，Tim-3可表達(dá)于人PBMC的多個(gè)細(xì)胞亞群，包括單核細(xì)胞、NK細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞等。單核細(xì)胞中Tim-3＋細(xì)胞比例較其它亞群高；除Th1細(xì)胞，Tim-3可能表達(dá)于CD4+T細(xì)胞中我們未檢測(cè)到的其它亞群。CD4+T細(xì)胞活化后Tim-3＋細(xì)胞比例升高，其中IFN-γ＋細(xì)胞中表達(dá)Tim-3的比例高于IFN-γ-細(xì)胞，提示Tim-3的表達(dá)可能與CD4+T細(xì)胞的功能，特別是