組織蛋白酶D基因沉默對人胰腺癌細胞系生物學(xué)行為的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的構(gòu)建組織蛋白酶D（cathepsinD，CD）基因穩(wěn)定干擾的胰腺癌L3.6pl細胞系，研究CD基因沉默對L3.6pl細胞體外生物學(xué)行為的影響。
　　方法構(gòu)建CDshRNA慢病毒載體并感染胰腺癌L3.6pl細胞，篩選穩(wěn)定細胞株，采用Real-timePCR及WesternBlot分別檢測CDmRNA和蛋白表達水平，并與陰性對照和空白對照組L3.6pl比較。采用MTT法、Transwell小室及流式細胞學(xué)分別檢測L3.6pl、NC

2、-L3.6pl、KD-L3.6pl三組細胞細胞體外增殖、遷移和侵襲的能力及細胞周期和凋亡的情況。
　　結(jié)果CD慢病毒載體感染L3.6pl后，Real-timePCR提示CDmRNA表達下降95.46％，WesternBlot顯示CD蛋白表達較干擾前顯著下降。KD-L3.6pl細胞的增殖和遷移能力較對照組均明顯減弱，Matrigel侵襲能力較對照組無明顯改變;抑制CD表達可誘導(dǎo)L3.6pl細胞周期發(fā)生再分布，G1期比例上升，S期和G

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