寧動(dòng)顆粒對(duì)抽動(dòng)—穢語綜合征模型大鼠紋狀體5-羥色胺系統(tǒng)的影響.pdf

1、背景：
　　抽動(dòng)-穢語綜合征(Tourette's syndrome，TS)，又稱為小兒多發(fā)性抽動(dòng)癥(Multipletics，MT)，是一種兒童期起病的慢性的復(fù)雜的神經(jīng)、精神障礙性疾病。臨床表現(xiàn)以頭面、腹部及四肢不自主抽動(dòng)、伴喉部不自主的發(fā)出奇特叫聲或詈罵不避親疏為特征，可合并強(qiáng)迫障礙(OCD)、注意力缺陷與多動(dòng)障礙(ADHD)、情緒障礙、學(xué)習(xí)障礙等。TS抽動(dòng)癥狀可因轉(zhuǎn)移注意力（如玩游戲機(jī)或看動(dòng)畫片）而減輕，也因緊張、興奮、疲勞

2、、發(fā)熱等而加重，癥狀于睡眠時(shí)消失。
　　TS的病因和發(fā)病機(jī)制至今尚不明確。絕大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為TS患者存在中樞神經(jīng)遞質(zhì)的代謝異常，其中，5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）系統(tǒng)功能異常在TS發(fā)病中的重要作用正逐漸引起人們重視。
　　TS病程較長(zhǎng)，少部分患者抽動(dòng)癥狀會(huì)持續(xù)至青春期以后，甚至終生不愈，故早期進(jìn)行有效的治療非常必要。長(zhǎng)期以來，TS的治療主要為口服以氟哌啶醇為代表的抗精神病類藥物，但由于治療周期

3、長(zhǎng)、不良反應(yīng)大，不能被所有患兒及其家長(zhǎng)接受，故開發(fā)研究臨床上安全有效的新型治療藥物已成為當(dāng)務(wù)之急。
　　寧動(dòng)顆粒是導(dǎo)師多年來治療TS的驗(yàn)方，其作為安全有效的中藥復(fù)方制劑已應(yīng)用于臨床多年，特別是對(duì)TS伴發(fā)的強(qiáng)迫障礙療效肯定。本研究主要是在課題組前期研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討寧動(dòng)顆粒治療TS的作用機(jī)制，為寧動(dòng)顆粒在臨床上治療TS提供科學(xué)實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。
　　目的：
　　1.觀察TS模型大鼠的行為學(xué)改變和紋狀體5-HT系統(tǒng)的變化。

4、
　　2.觀察寧動(dòng)顆粒對(duì)TS模型大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)和紋狀體5-HT系統(tǒng)的影響，探討寧動(dòng)顆粒治療TS的作用機(jī)制。
　　方法：
　　雄性Wistar大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只:
　　(1)空白對(duì)照組（Control）;
　　(2)模型組(IDPN);
　　(3)寧動(dòng)顆粒低劑量組(NGL);
　　(4)寧動(dòng)顆粒高劑量組(NGH);
　　(5)氟哌啶醇對(duì)照組(Hal)。
　　采用亞氨

5、基二丙腈(IDPN)腹腔注射制作TS大鼠模型:除空白對(duì)照組外，余大鼠均按150mg.kg-1.d-1腹腔注射IDPN，空白對(duì)照組給予等量無菌生理鹽水腹腔注射，每天一次，連續(xù)注射7天。造模成功后，NGL組給予寧動(dòng)顆粒250mg.kg-1.d-1;NGH組給予寧動(dòng)顆粒370mg.kg-1.d-1;Hal組給予氟哌啶醇10mg.kg-1.d-1;空白對(duì)照組及IDPN組分別給予等量蒸餾水。各組大鼠均灌胃給藥，每日8:00～10:00a.m.給藥

6、一次，連續(xù)給藥8周。觀察動(dòng)物行為學(xué)改變并評(píng)分。
　　末次灌胃給藥并在行為學(xué)觀察結(jié)束后，5％水合氯醛0.7ml/100g腹腔注射麻醉，0.9％生理鹽水快速灌注，斷頭處死，迅速于冰上剝離出雙側(cè)紋狀體，液氮速凍后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱凍存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)各組大鼠紋狀體內(nèi)5-HT、5-HIAA含量，并利用實(shí)時(shí)定量熒光PCR技術(shù)(RT-PCR)檢測(cè)紋狀體中5-HT1AR和SERT的基因表達(dá)量。
　　所有數(shù)據(jù)采用S

7、PSS17.0分析軟件(version17.0，SPSS Inc.USA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，服從正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±S)表示，組間差異的比較采用方差分析或者兩兩比較的t檢驗(yàn);P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.治療前后大鼠刻板行為指標(biāo)比較
　　連續(xù)灌胃治療8周后，NGL組、NGH組和Hal組大鼠刻板行為指標(biāo)較治療前明顯下降，與同期IDPN組相比明顯減少(P＜0.01)。
　　

8、2.大鼠紋狀體中5-HT含量的比較
　　IDPN組大鼠紋狀體內(nèi)5-HT含量顯著高于空白對(duì)照組（5.90±0.34vs5.09±0.35ng/ml，P＜0.01）。與IDPN組相比，NGL組含量升高不明顯（6.17±0.44vs5.90±0.34ng/ml，P＞0.05）;NGH組和Hal組5-HT含量顯著上升（6.48±0.40vs5.90±0.34ng/ml;6.46±0.40vs5.90±0.34ng/ml,P＜0.01）。<

9、br>　　3.大鼠紋狀體中5-HIAA含量的比較
　　IDPN組大鼠紋狀體5-HIAA含量明顯高于空白對(duì)照組（0.99±0.09vs0.68±0.07ng/ml，P＜0.05）。與IDPN組相比，NGL組、NGH組和Hal組大鼠紋狀體5-HIAA含量均明顯降低（0.91±0.08vs0.99±0.09ng/ml;0.89±0.08vs0.99±0.09ng/ml;0.89±0.09vs0.99±0.09ng/ml，P＜0.05)。

10、
　　4.大鼠紋狀體5-HT1ARmRNA表達(dá)水平
　　IDPN組大鼠紋狀體內(nèi)5-HT1ARmRNA表達(dá)顯著低于空白對(duì)照組（0.60±0.12vs1.00±0.00，P＜0.01）。與IDPN組相比，NGL組、NGH組和Hal組5-HT1ARmRNA表達(dá)均進(jìn)一步下降（0.41±0.09vs0.60±0.12;0.23±0.07vs0.60±0.12;0.29±0.05vs0.60±0.12,P＜0.01）。
　　5.大

11、鼠紋狀體SERTmRNA表達(dá)水平
　　IDPN組大鼠紋狀體SERTmRNA表達(dá)顯著低于空白對(duì)照組（0.59±0.13vs1.00±0.00，P＜0.01）。NGL組、NGH組和Hal組與IDPN組相比SERTmRNA表達(dá)均呈顯著下降(0.44±0.14vs0.59±0.13，P＜0.05;0.26±0.09vs0.59±0.13，P＜0.01;0.34±0.08vs0.59±0.13，P＜0.01)。
　　結(jié)論：