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文檔簡介
1、隨著抗生素的廣泛及不規(guī)范使用,細菌的耐藥特別是多重耐藥問題日趨嚴重。而獲得外源性耐藥基因是大多數細菌產生耐藥性的原因。具有捕獲及表達外來耐藥基因能力的整合子-基因盒系統作為新的細菌耐藥性傳播機制正越來越受關注?;蚝惺切〉目梢苿拥拿撗鹾颂呛怂酓NA分子,攜帶耐藥基因,通常整合到整合子中轉錄;整合子是保守、可移動的轉座子樣DNA元件,可以整合耐藥基因在細菌之間水平傳播,對于細菌間耐藥基因的擴散和多重耐藥性的產生起重要作用。 本文主
2、要研究了分離自閩江流域的病原性大腸桿菌Ⅰ類整合子的分布情況、其攜帶耐藥基因盒種類和結構情況,以及與耐藥性的關系。方法使用整合酶基因擴增法檢測Ⅰ類整合子,再擴增部分陽性菌株的基因盒插入區(qū),并結合限制性片段長度多態(tài)性分析(RFLP)和DNA測序技術分析整合子可變區(qū)基因盒的種類和排列。并依據NCCLS(2003)推薦的紙片擴散法測定了200株大腸桿菌對20種抗生素的耐藥性。 在500株大腸埃希菌中檢出209株為第Ⅰ類整合酶基因陽性,占
3、41.8%。藥敏實驗表明,所有供試菌株均有不同程度的耐藥性,最少的抗2種抗生素,最高則達到抗16種。Ⅰ型整合子與大腸桿菌的耐藥性呈正相關,即整合子陽性菌比整合子陰性菌有更強的耐藥性。 耐藥基因盒擴增結果顯示:37.5%(15/40)整合子陽性菌株可變區(qū)擴增陽性,擴增片段大小為0.6~2kb;大小相同的Ⅰ類整合子有相同的酶切圖譜,共檢出4種不同的可變區(qū)??勺儏^(qū)基因盒排列分別為:addA1(編碼氨基糖苷類耐藥性);dfrA1-aad
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