微囊化牛視網(wǎng)膜色素上皮細胞移植治療帕金森病大鼠的實驗研究.pdf

1、尋找來源廣泛的有效替代細胞系一直是帕金森病(Parkinson′sdisease，PD)細胞移植領域備受關注的問題。本實驗試用牛RPE細胞作為人胚RPE的替代供體應用于大鼠的PD模型，觀察移植后療效，期待其能夠解決供體細胞的來源問題。　　免疫排斥反應是異種移植中的最大障礙。本實驗的主要研究內容及目的：1.詳細研究牛RPE細胞體外多巴胺及神經(jīng)營養(yǎng)因子的分泌特性，觀察微囊包裹對細胞活性和其分泌特性的影響，從而探討其可能的作用機制并為下一步

2、的移植奠定堅實的理論基礎。2.將該細胞用海藻酸鈉-多聚賴氨酸包裹制作成微囊后，立體定向移植入大鼠PD模型的右側紋狀體，觀察移植后療效及移植免疫排斥反應。3.除了將該細胞應用于傳統(tǒng)的6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)大鼠PD模型之外，還在本實驗室以往工作的基礎上，將細胞移植入選擇性蛋白酶體抑制劑lactacystin制作的伴Lewy小體形成的PD模型。該模型比6-OHDA模型更接近PD患者的病理改變，能更好

3、的模擬自然狀態(tài)下的PD產(chǎn)生過程，若應用成功將有更強的說服力。　　第一部分是牛RPE細胞的體外原代培養(yǎng)及鑒定　　目的：建立穩(wěn)定的牛RPE細胞原代培養(yǎng)、純化及鑒定方法。　　第二部分是牛RPE細胞體外生物學特性研究　　目的：觀察牛RPE細胞體外DA以及神經(jīng)營養(yǎng)因子的分泌特性，檢測該細胞中THmRNA以及蛋白水平的表達?！　〉谌糠质呛Ｔ逅徕c微囊的制作及微囊對細胞生物活性的影響　　目的：優(yōu)化適合牛RPE細胞的微囊制作條件，觀察微囊化