OTU1基因對結腸癌細胞生長的影響.pdf

1、去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes，DUBs)是一類具有逆轉泛素化作用的蛋白酶。近年來研究發(fā)現(xiàn)，去泛素化酶不僅在細胞的正常生理活動中發(fā)揮重要作用，而且可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關系。卵巢腫瘤相關蛋白酶1(OTUdomain-containing ubiquitin aldehyde-binding protein1，OTU1)是去泛素化酶家族成員之一，在腫瘤中具體作用及其作用機制還未明確。因此我們通過探討OT

2、U1在結腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，從而進一步了解OTU1與人類腫瘤的關系。
　　方法：應用實時定量PCR(Real-time PCR)和免疫組織化學技術，在mRNA和蛋白水平上檢測了OTU1在結腸癌組織中的表達情況。應用質粒載體經脂質體轉染建立OTU1過表達細胞株，并應用慢病毒載體系統(tǒng)建立了OTU1干擾細胞株;利用CCK-8實驗分析了OTU1過表達或干擾對結腸癌細胞生長的影響;Transwell和Matrigel膠穿實驗分析了其對結

3、腸癌細胞遷移和侵襲的影響。
　　研究結果顯示:結腸癌組織中OTU1 mRNA的表達量較其配對癌旁高3.5倍，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。免疫組織化學結果顯示OTU1蛋白在結腸癌組織中的高表達率明顯高于其相應的癌旁正常粘膜組織，差異具有統(tǒng)計學意義(x2=4.09，P＜0.05);其在結腸癌中的表達水平與患者的年齡、性別、有無遠處轉移、Duke's分期之間的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);與腫瘤大小(P＜0.01)、腫瘤分期

4、(P＜0.01)、淋巴結轉移(P＜0.01)密切相關，差異具有明顯的統(tǒng)計學意義;OTU1蛋白在癌旁正常粘膜-腺瘤-結腸癌中的表達呈遞增趨勢，高表達率分別為:11.11％、55.56％和77.78％，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。OTU1過表達能夠促進結腸癌細胞在體外的生長，促進結腸癌細胞的遷移和侵襲能力。反之，OTU1表達受干擾后，結腸癌細胞在體外的生長被抑制，遷移和侵襲能力減弱。
　　結論:OTU1的mRNA和蛋白水平均在