香芹酚對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、第一部分：香芹酚對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用
　　目的：觀察香芹酚(Carvacrol，CAR)對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷是否具有神經(jīng)保護(hù)作用。
　　方法：將雄性ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(sham)組、假手術(shù)+CAR組、I/R（tMCAO）組和I/R+CAR組，建立小鼠短暫性大腦中動(dòng)脈阻塞(transient middle cerebral artery occlusion，tMCAO)模型，觀察CAR的干預(yù)(不同給藥劑

2、量、給藥時(shí)間及給藥方式)對(duì)小鼠腦梗死體積及神經(jīng)行為功能的影響。
　　結(jié)果：與I/R組相比，經(jīng)CAR干預(yù)后小鼠的腦梗死體積明顯減小，神經(jīng)行為功能顯著改善。腦缺血再灌注前腹腔預(yù)給予CAR50mg/kg，腦梗塞體積減小了44.3%；神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分明顯降低（P<0.05）；腹腔預(yù)給予CAR25mg/kg腦梗死體積仍有所減?。≒<0.05），而腹腔預(yù)給予CAR5mg/kg腦梗死體積未見(jiàn)減?。≒>0.05），證明該神經(jīng)保護(hù)作用具有藥物劑量依賴

3、性。在腦缺血再灌注后不同時(shí)間段分別予以腹腔及側(cè)腦室注射CAR，同樣減小了腦梗死體積；通過(guò)對(duì)小鼠側(cè)腦室注射 CAR10ug/只，在小鼠腦缺血再灌注后6小時(shí)給藥仍能使腦梗死體積減?。≒<0.05）。證明該神經(jīng)保護(hù)作用與注藥時(shí)間及注藥方式有關(guān)。
　　結(jié)論：使用香芹酚干預(yù)小鼠tMCAO模型，小鼠的腦梗死體積明顯減小，神經(jīng)行為功能缺損明顯減輕。這些均提示香芹酚對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷具有神經(jīng)保護(hù)作用。
　　第二部分：香芹酚對(duì)小鼠腦缺血再

4、灌注損傷神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制
　　目的：研究香芹酚（CAR）對(duì)腦缺血再灌注損傷后小鼠腦組織內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響及與PI3K/Akt信號(hào)通路的關(guān)系，探討香芹酚神經(jīng)保護(hù)作用的相關(guān)機(jī)制。
　　方法：將雄性ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(sham)組、假手術(shù)+CAR組、I/R（tMCAO）組和I/R+CAR組；取缺血損傷側(cè)腦組織，采用Western blot法測(cè)定t-Akt、p-Akt、Cleaved Caspase-3表達(dá)情況；行側(cè)腦

5、室注射PI3K/Akt信號(hào)通路抑制劑LY-294002，通過(guò)Westwen blot法測(cè)定小鼠腦組織內(nèi)t-Akt及p-Akt的表達(dá)水平。觀察注射LY-294002后對(duì)CAR神經(jīng)保護(hù)作用的影響。
　　結(jié)果：Western blot測(cè)定凋亡相關(guān)蛋白Cleaved Caspase-3顯示：與sham組及sham+CAR組相比，I/R組和I/R+CAR組中Cleaved Caspase-3的表達(dá)水平顯著增高（P<0.05）；與I/R組相比

6、，I/R+CAR組的Cleaved Caspase-3表達(dá)水平明顯下降。與sham組相比，I/R組p-Akt的表達(dá)增高（P<0.05）；與I/R組相比，I/R+CAR組p-Akt表達(dá)顯著增高（P<0.05）；側(cè)腦室注入LY-294002， LY-294002可以有效抑制p-Akt表達(dá)水平；在tMCAO模型中，CAR的神經(jīng)保護(hù)作用因?yàn)長(zhǎng)Y-294002的干預(yù)而消失，腦梗塞體積與I/R組沒(méi)有明顯差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：香芹酚