姜黃素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87的放療增敏作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究姜黃素(Curcumin)與放療單用或者聯(lián)用對(duì) U87人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系的生長(zhǎng)抑制效果、U87細(xì)胞的形態(tài)學(xué)的變化、以及對(duì)于細(xì)胞周期分布和特異蛋白的影響。根據(jù)所得結(jié)果分析姜黃素在體外放療增敏作用，其劑量與效應(yīng)關(guān)系、時(shí)間與效應(yīng)關(guān)系、效應(yīng)分子變化特征等。
　　方法：不同濃度姜黃素作用于人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞24h后，改良MTT法（CCK-8）檢測(cè)姜黃素藥物毒性；姜黃素與放療單用和聯(lián)用后，通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)（clone-forming

2、 assay）觀察姜黃素對(duì) U87細(xì)胞放射敏感性的影響，采用 TUNEL法檢測(cè)各組膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡細(xì)胞；以流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組膠質(zhì)瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期分布（細(xì)胞處于G1、S、G2的比率）。采用western blotting測(cè)定姜黃素對(duì)雙特異性磷酸酶-2（DUSP-2）、JNK及ERK等表達(dá)水平的影響。
　　結(jié)果：姜黃素對(duì)人膠質(zhì)瘤 U87細(xì)胞具有明顯的抑制作用，可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，其效應(yīng)呈現(xiàn)明顯的時(shí)間和劑量依賴。選擇對(duì)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞影響較

3、小的劑量（5?mol/L、10?mol/L）即可顯著降低放射后 U87細(xì)胞的克隆形成率，其放射增敏比為1.71和4.65；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，姜黃素可將U87細(xì)胞阻滯在放射敏感時(shí)相G2/M期。應(yīng)用western blotting測(cè)定發(fā)現(xiàn)，姜黃素可引起DUSP-2的表達(dá)上調(diào)，而抑制下游ERK和JNK的表達(dá)。
　　結(jié)論：低劑量的姜黃素對(duì)人膠質(zhì)瘤 U87細(xì)胞有放射增敏作用，其機(jī)制可能是，姜黃素引起DUSP-2表達(dá)水平提高，同時(shí)調(diào)控下游通