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1、目的:觀察氟伐他汀對(duì)溶血磷脂酰膽堿損傷人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用,探討他汀類(lèi)藥物降脂作用以外的其他抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制,為他汀類(lèi)藥物的臨床應(yīng)用提供新的依據(jù)。 方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,待細(xì)胞生長(zhǎng)到融合狀態(tài)時(shí)加入不同濃度(10-7-10-5mol/L)的氟伐他汀孵育20分鐘,然后加入溶血磷脂酰膽堿(5mg/L)作用24小時(shí),用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)eNOS mRNA、MMP-9 mRNA的表達(dá),免疫細(xì)
2、胞染色法檢測(cè)NF-KBp65、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,四唑鹽比色實(shí)驗(yàn)(MTT)檢測(cè)細(xì)胞活力,比色法檢測(cè)各組細(xì)胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、乳酸脫氫酶(LDH)的活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量的變化。 結(jié)果: 1、溶血磷脂酰膽堿能明顯誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9 mRNA和NF-KBp65、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表達(dá),抑制eNOS mRNA的表達(dá),
3、降低SOD、GSH的活性、NO的含量和細(xì)胞活力,并能明顯增加LDH的活性、MDA的含量以及促進(jìn)細(xì)胞凋亡; 2、預(yù)先應(yīng)用不同濃度的氟伐他汀干預(yù)后,可劑量依賴性的抑制上述效應(yīng); 3、用一氧化氮合酶抑制劑左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)抑制一氧化氮合酶降低NO的合成后,可部分取消氟伐他汀的保護(hù)作用。 結(jié)論: 1、溶血磷脂酰膽堿可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng),導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂; 2、氟伐他
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