S100A4在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其在子宮內(nèi)膜癌侵襲轉(zhuǎn)移中的機(jī)制研究.pdf

1、目的：探究S100A4在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)方式及其臨床意義；探索S100A4對子宮內(nèi)膜癌HEC-1B細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響及其可能的機(jī)制。
　　方法：采用免疫組織化學(xué)方法檢測正常子宮內(nèi)膜、非典型增生及子宮內(nèi)膜癌組織中S100A4的表達(dá)。運用脂質(zhì)體lipofectamine2000將構(gòu)建的4種S100A4-shRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)入HEC-1B細(xì)胞，取轉(zhuǎn)染效率最高組細(xì)胞進(jìn)行嘌呤霉素穩(wěn)定篩選及擴(kuò)增培養(yǎng)，獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株；運用實時熒光定

2、量 PCR及免疫印跡（western-blot）方法檢測轉(zhuǎn)染前后S100A4、VEGF、MMP-2基因和蛋白的表達(dá)變化；運用體外劃痕實驗及Transwell小室法檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞遷移、侵襲能力的改變。
　　結(jié)果：1.S100A4在內(nèi)膜癌組織腺上皮中的陽性表達(dá)率（32％）顯著高于正常內(nèi)膜腺上皮（0%）（P<0.01），而其在子宮內(nèi)膜癌與非典型增生腺上皮中的表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；S100A4蛋白的腺上皮表達(dá)與腫瘤的病理分級及淋巴

3、結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P<0.001）；2.S100A4-shRNA可有效抑制 HEC-1B細(xì)胞 S100A4的表達(dá)，伴隨VEGF表達(dá)的下降（P<0.05）,而MMP-2的表達(dá)無顯著差異；S100A4表達(dá)下調(diào)后，HEC-1B細(xì)胞體外遷移和侵襲能力也顯著下降（P<0.01）。
　　結(jié)論：S100A4在子宮內(nèi)膜癌腺上皮中的表達(dá)率隨內(nèi)膜癌組織的病理分級升高增加，在內(nèi)膜癌患者的預(yù)后中可能有重要意義。S100A4表達(dá)下調(diào)可明顯抑制腫瘤細(xì)胞的遷移、