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文檔簡介
1、目的:觀察不同濃度軟脂酸在體外對胰島INS-1細胞功能活性與凋亡的影響及SREBP-1c的基因變化。
方法:培養(yǎng)INS-1細胞,將在生長對數(shù)期的細胞分為實驗組和對照組。實驗組加入含不同濃度(100μmol/l、200μmol/l、300μmol/l、400μmol/l)軟脂酸的培養(yǎng)基,對照組加入不含軟脂酸的培養(yǎng)基。各組細胞在相同條件下培養(yǎng)6h,24h,使用MTT監(jiān)測細胞數(shù)目及活力,碘化丙啶(PI)單染后經(jīng)流式細胞儀檢測細胞
2、凋亡率及周期,用半定量RT-PCR檢測觀察insulin、SREBP-1c、insig-1mRNA的表達。
結果:胰島INS-1細胞經(jīng)100μmol/l、200μmol/l、300μmol/l、400μmol/l濃度的軟脂酸干預6h后,細胞功能活性、細胞凋亡率與對照相比無明顯差別(P>0.05),100μmol/l、200μmol/l、300μmol/l軟脂酸干預后基礎胰島素分泌量較對照組增加(P<0.05),400μmo
3、l/l軟脂酸干預后與對照組無明顯差異,insulin mRNA的表達無明顯變化。而經(jīng)軟脂酸干預24h時,細胞活力和數(shù)目與對照組相比下降,細胞凋亡率明顯增加,且隨著軟脂酸濃度的增加,胰島INS-1細胞基礎胰島素分泌量減少,insulin mRNA表達下調,SREBP-1c、insig-1 mRNA表達無明顯變化。
結論:短期低濃度軟脂酸促INS-1細胞胰島素分泌,對凋亡無明顯影響;長期軟脂酸干預,影響INS-1細胞功能、促進
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