大豆異黃酮對(duì)慢性腎損害大鼠營(yíng)養(yǎng)狀況影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的 采用腺嘌呤灌喂方法建立腎損害大鼠模型，經(jīng)灌喂途徑給予不同劑量大豆異黃酮(SIF)，觀察SIF對(duì)慢性腎損害大鼠脂代謝的影響和營(yíng)養(yǎng)狀況是否具有改善作用，不同劑量組之間是否存在差別。初步探討SIF促進(jìn)慢性腎損害大鼠改善腎功能及利于維護(hù)營(yíng)養(yǎng)狀況，以及給予的有效劑量，為將SIF應(yīng)用于慢性腎損害營(yíng)養(yǎng)治療，提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 1．建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型：健康成年Wistar雄性大鼠30只，將腺嘌呤配制成2％溶液，按200mg

2、/kg灌喂2周，1/d；2周后按100mg/kg的劑量灌喂1周，隔日 1次。共3w。通過(guò)腎功能相關(guān)的血生化指標(biāo)測(cè)定及病理組織學(xué)觀察，確定慢性腎損害模型建立成功。 2．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：將27只腎損害模型按體質(zhì)量大小編號(hào)，隨機(jī)分為3組，每組9只。①對(duì)照組，予同等量花生油灌喂，1/d；②sIF小劑量組，予SIF 6mg/kg．d，1/d；③SIF大劑量組，予SIF 12mg/kg.d，1/d。 3．動(dòng)物一般狀況檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)期間觀察

3、大鼠飲食、活動(dòng)、皮毛色澤、體重等變化。 4．血生化指標(biāo)檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)第0天、第42天時(shí)，于大鼠眶后靜脈采血2ml，測(cè)血清甘油三酯(TG)、總心固醇(CHOL)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血漿尿素(BU)、血清肌酐(Scr)、血清總蛋白(TP)和血清白蛋白(ALB)。留取24小時(shí)尿，測(cè)定尿蛋白排泄量(UPE)。5．腎臟病理組織學(xué)觀察：造模后，取大鼠腎組織切片，行HE和MASSON染色。 6．?dāng)?shù)據(jù)分析：實(shí)驗(yàn)

4、數(shù)據(jù)以均數(shù)(Mean)和標(biāo)準(zhǔn)差(SD)表示，應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。腎損害大鼠SIF治療前后及不同組別對(duì)生化指標(biāo)的影響采用重復(fù)測(cè)量方差分析處理，在固定效應(yīng)后做時(shí)間、分組之間的單獨(dú)效應(yīng)分析，P<0.05視為有顯著性差異。 結(jié)果 1．一般情況：隨著腺嘌呤給藥天數(shù)增加，大鼠逐漸出現(xiàn)攝食量減少、飲水量增加伴尿量明顯增多，外觀體毛干枯無(wú)光澤，精神萎靡、活動(dòng)減少等表現(xiàn)。造模后出現(xiàn)蛋白尿。給予SIF干預(yù)后，對(duì)照組體毛依然

5、干枯無(wú)光澤、精神狀態(tài)、活動(dòng)能力降低；SIF治療組在干預(yù)2周后，體毛逐漸開(kāi)始恢復(fù)光澤；3組大鼠體重實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，均重于實(shí)驗(yàn)前，但組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)照組于實(shí)驗(yàn)第3天、SIF大劑量組于實(shí)驗(yàn)第15天各死亡1只。對(duì)照組大鼠左眼眶前出現(xiàn)膿腫，可能與感染有關(guān)；SIF大劑量組大鼠解剖見(jiàn)胸腔內(nèi)大量胸水，可能與嚴(yán)重的腎功能衰竭有關(guān)。 2．腎功能指標(biāo)：SIF干預(yù)前，各組之間BU、Scr、UPE差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.

6、05)。SIF干預(yù)42天時(shí)，BU、Scr、LJPE在對(duì)照組、SIF小劑量組、SIF大劑量組之問(wèn)有顯著性差異(P<0.05)，F(xiàn)值分別為8.239，5.218和11.051；P值分別為0.002，0.014和0.000。LSD比較，BU、Scr、UPE水平在SIF治療組與對(duì)照組之間比較有顯著性差異(P<0.05)，而SIF治療組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3．血脂指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組后，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始(T0)時(shí)，CHOL、

7、TG、HDL、LDL 各組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束(T42)時(shí)，對(duì)照組以上指標(biāo)保持原有水平，SIF治療組TG、CHOL、LDL下降，HDL 升高。CHOL、TG、HDL、LDL在對(duì)照組、SIF小劑量組和SIF大劑量組之間有顯著性差異(P<0.05)，F(xiàn)值分別為27.405，24.617，21.261，22.597；P值均為0.000 o。LSD比較，TG、CHOL、LDL、HDL 在對(duì)照組與SIF治療組之間有顯著性

8、差異(P<0.05)，SIF小劑量組與SIF大劑量組之間比較，上述指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4.血清總蛋白(TP)和血清白蛋白(ALB)測(cè)定結(jié)果：各組42天時(shí)，對(duì)照組、SIF小劑量組、SIF大劑量組TP分別為(73.55±3.54)g/L、(78.50±3.63)g/L、(79.88±3.98)g/L，F(xiàn)=6.462,P=O.006；ALB分別為(27.83±1.60)g/L、(32.15±0.97)g/L、(32.47±1

9、.17)g/L。F=33.936,P=0.000。SIF治療組TP和ALB明顯高于對(duì)照組，SIF治療組與對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)，SIF治療組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 5.腎臟病理組織學(xué)觀察結(jié)果：腺嘌呤給藥3周后，隨機(jī)取3只大鼠做腎臟組織病理學(xué)檢查。腎小球數(shù)量減少，平均每個(gè)低倍視野2～4個(gè)(正常6～8個(gè))，呈萎縮狀，形態(tài)基本正常。腎小管囊狀擴(kuò)張，腎皮質(zhì)廣泛結(jié)晶沉積，結(jié)晶周圍可見(jiàn)異物巨細(xì)胞反應(yīng)，大量腎小