針刺對(duì)實(shí)驗(yàn)性乳腺增生模型大鼠干預(yù)作用的研究.pdf

1、乳腺增生病，屬中醫(yī)“乳癖”范疇，是婦女最常見的乳腺疾病，近年來(lái)發(fā)病率有明顯上升趨勢(shì)，發(fā)病率約占育齡婦女的40％左右。本病的不同發(fā)展階段有一定的癌變率，故對(duì)婦女的身體和精神健康均造成一定的威脅。針灸治療本病療效較為滿意，安全無(wú)毒副作用。為了更全面深入探討針刺治療乳腺增生病的作用機(jī)理，本文從以下兩方面進(jìn)行了研究。 1文獻(xiàn)研究本文對(duì)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)有關(guān)乳房結(jié)構(gòu)、發(fā)育和生理，內(nèi)分泌對(duì)乳腺的影響，乳腺增生病的發(fā)病、病因病機(jī)及治療的文獻(xiàn)進(jìn)行了較系統(tǒng)

2、全面整理，并就中醫(yī)論述乳房生理及病理、乳房與臟腑經(jīng)絡(luò)、乳癖的病因病機(jī)及辨證論治、針灸治療的古今文獻(xiàn)進(jìn)行了較為系統(tǒng)全面的文獻(xiàn)整理，為進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究奠定了理論基礎(chǔ)。 1.1現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的認(rèn)識(shí)：乳腺組織的生理、病理變化受下丘腦一垂體一卵巢軸及其他內(nèi)分泌腺的綜合控制和調(diào)節(jié)，尤以卵巢激素的影響最大。在月經(jīng)周期中，乳腺組織受雌、孕激素的影響，也隨著子宮內(nèi)膜增殖、分泌、脫落的變化，發(fā)生著增生和復(fù)舊的周期性變化。這種周期性的改變，是乳腺增生病發(fā)病

3、的生理基礎(chǔ)。乳腺增生的病理改變?yōu)槿橄僦髻|(zhì)和間質(zhì)不同程度地增生與復(fù)舊不全所致的乳腺結(jié)構(gòu)在數(shù)量上和形態(tài)上的異常，是乳腺實(shí)質(zhì)的良性增生。其發(fā)病原因主要是內(nèi)分泌激素失調(diào)的觀點(diǎn)已被大多數(shù)學(xué)者公認(rèn)。目前認(rèn)為，雌激素水平相對(duì)增多而黃體素水平相對(duì)低下，雌激素過(guò)度刺激而缺乏孕酮的保護(hù)作用是本病發(fā)生的一個(gè)重要因素。雌激素能刺激乳腺組織增生，引起乳腺導(dǎo)管擴(kuò)張和囊腫形成，是影響乳腺增生發(fā)生發(fā)展轉(zhuǎn)歸的重要因素。乳腺增生病的不同發(fā)展階段有一定的癌變率。乳腺的非典型

4、增生癥可歸為乳腺癌的癌前期病變范疇。根據(jù)乳腺癌發(fā)展的漸進(jìn)模式理論，正常乳腺的上皮細(xì)胞惡化需經(jīng)歷一個(gè)從良性增生到細(xì)胞間變，從不典型增生、癌前期病變逐漸發(fā)展為乳腺惡性腫瘤的過(guò)程。而細(xì)胞基因的突變和調(diào)控失常，是正常細(xì)胞向惡性轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵。這一理論，為臨床上積極治療乳腺增生病、阻斷癌前期病變提供了有力的理論依據(jù)。 1.2中醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)：中醫(yī)認(rèn)為乳房的發(fā)育、生長(zhǎng)、衰萎受五臟六腑之精氣支配。其中以腎的先天精氣，脾胃的后天水谷精氣，肝的藏血與疏調(diào)氣

5、機(jī)，對(duì)乳房的生理病理影響最大。乳房與經(jīng)絡(luò)聯(lián)系廣泛而密切，乳房及其周圍經(jīng)絡(luò)縱橫，腧穴密布，其中與足陽(yáng)明胃經(jīng)、足少陰、足厥陰肝經(jīng)及沖任二脈關(guān)系最為密切。經(jīng)絡(luò)與乳房密切相關(guān)這一生理基礎(chǔ)，為乳癖外治法(針灸、按摩、外敷藥貼)提供了充實(shí)的中醫(yī)理論依據(jù)。乳腺增生病屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)“乳癖”范疇。乳癖是本虛標(biāo)實(shí)之證，以肝腎不足，沖任失調(diào)為本，氣滯、痰凝、血瘀為標(biāo)。病機(jī)主要是肝氣郁結(jié)，血瘀痰凝，阻閉乳絡(luò)所致。中醫(yī)藥在治療乳腺增生病方面積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)。治

6、療原則可歸納為：早期治療，既病防變；扶正與祛邪相結(jié)合；內(nèi)外同治。針灸治療本病療效較為滿意，無(wú)毒副作用，臨床應(yīng)用十分普遍；機(jī)理研究主要集中在組織形態(tài)學(xué)、激素和激素受體的層面。研究表明，針灸和中藥能調(diào)節(jié)患者血液雌二醇等激素水平，影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物乳腺組織雌激素受體(ER)和孕激素受體的表達(dá)。 2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究本研究選擇過(guò)量雌激素誘導(dǎo)大鼠乳腺增生為模型，應(yīng)用組織形態(tài)學(xué)、放射免疫學(xué)、免疫組織化學(xué)等方法，圍繞著雌激素、雌激素受體和雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通

7、路(雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的非基因組效應(yīng)的MAPK通路)而展開，觀察針刺對(duì)乳腺組織形態(tài)學(xué)、雌激素(E2)、雌激素受體(ER)、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)、一氧化氮合酶(NOS)表達(dá)的效應(yīng)。結(jié)果如下： 2.1造模大鼠乳頭高度明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，其中以模型組增長(zhǎng)最明顯。正常組乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞排列規(guī)則，導(dǎo)管腔、腺泡腔無(wú)擴(kuò)張，小葉及小葉中腺泡數(shù)極少。模型組乳腺導(dǎo)管上皮排列紊亂、增生明顯，導(dǎo)管管腔、腺泡腔明顯擴(kuò)張，腺泡數(shù)增加

8、明顯，間質(zhì)纖維結(jié)締組織明顯增生。表明過(guò)度雌激素的刺激可引起大鼠乳腺組織增生，造模是成功的。 2.2針刺組的乳腺導(dǎo)管上皮排列基本規(guī)則，在觀察指標(biāo)上與模型組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)上意義：乳頭高度(P＜0.05)、腺泡數(shù)目(P＜0.05)、腺泡腔直徑(P＜0.01)和導(dǎo)管直徑(P＜0.01)。提示針刺對(duì)雌激素過(guò)度刺激所誘導(dǎo)的大鼠乳腺組織增生具有抑制作用，這為臨床針灸治療本病提供了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 2.3雌激素水平：模型組血清E2水平明

9、顯上升，為4組中最高，與正常組相比差異有非常顯著性意義(P＜0.01)；針刺組、西藥組與正常組比較，血清E2水平雖有上升，差異均有顯著性意義(P＜0.05)，但升高幅度不及模型組。針刺組、西藥組與模型組比較，血清E2水平下降，差異均有顯著性意義(P＜0.05)。 2.4雌激素受體表達(dá)：與正常組比較，三組ER受體陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均有增加，其中以模型組最明顯，有非常顯著性差異(P＜0.01)；針刺組次之，西藥組最低，差異均有顯著性意義(P

10、＜0.05)。針刺組、西藥組與模型組比較，ER受體陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較低，差異均有非常顯著性意義(P＜0.01)。 2.5細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶蛋白表達(dá)：與正常組比較，三組ERK蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均有增加，其中以模型組最明顯，有非常顯著性差異(P＜0.01)；針刺組次之，西藥組最低，差異均有顯著性意義(P＜0.05)。針刺組、西藥組與模型組比較，ERK蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較低，差異均有非常顯著性意義(P＜0.01)。 2.6一氧化氮合

11、酶蛋白表達(dá)：與正常組比較，三組eNOS蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均有增加，其中以模型組最明顯，有非常顯著性差異(P＜0.01)；針刺組次之，西藥組最低，差異均有顯著性意義(P＜0.05)。針刺組、西藥組與模型組比較，eNOS蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較低，差異均有非常顯著性意義(P＜0.01)。 3結(jié)論3.1通過(guò)對(duì)古今文獻(xiàn)的研究，我們認(rèn)為針灸治療乳腺增生病具有充實(shí)的中醫(yī)理論依據(jù)、較好的臨床療效和一定積累的機(jī)理研究工作， 3.2研究結(jié)果顯

12、示，過(guò)度雌激素的刺激可引起大鼠乳腺組織增生，而針刺對(duì)雌激素過(guò)度刺激所誘導(dǎo)的大鼠乳腺組織增生具有抑制作用，這為臨床針灸治療本病提供了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 3.3研究結(jié)果表明，一定量的外源性雌激素可引起血清E2水平升高，ER、ERK和eNOS蛋白表達(dá)增強(qiáng)。提示ERK通路和NO在乳腺增生的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸的病理過(guò)程中的作用是不容忽略的。研究對(duì)它們的調(diào)控干預(yù)手段，對(duì)阻止乳腺增生病癌前期病變的演變有重要意義。 3.4針刺抑制乳腺增生作用

13、機(jī)理研究中發(fā)現(xiàn)：①針刺“膻中”“三陰交”穴能降低外源性雌二醇所致的血清高雌激素水平，從而提示針刺的治療作用與調(diào)整機(jī)體血清E2水平有關(guān)。 ②針刺組的ER受體陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)低于模型對(duì)照組(P＜0.01)，提示針刺膻中、三陰交穴有抑制ER表達(dá)的作用，從而下調(diào)雌激素對(duì)乳腺的促增生作用，起到抑制乳腺增生的作用。 ③針刺組的ERK蛋白表達(dá)水平低于模型對(duì)照組(P＜0.01)，提示針刺膻中、三陰交穴有抑制ERK表達(dá)的作用。我們推測(cè)，針刺可能

14、通過(guò)ERK通路，從而下調(diào)雌激素對(duì)乳腺組織細(xì)胞增殖、分化及血管擴(kuò)張等生物學(xué)效應(yīng)，達(dá)到抑制乳腺增生的作用。提示針刺對(duì)于阻斷乳腺增生病癌前期病變的演變有一定意義。 ④針刺組的eNOS蛋白表達(dá)水平低于模型對(duì)照組(P＜0.01)，提示針刺可調(diào)節(jié)過(guò)量雌激素誘發(fā)的大鼠乳腺增生組織中eNOS蛋白表達(dá)。這一作用可能有利于保護(hù)乳腺組織，阻斷從增生到不典型增生、癌前期病變逐漸發(fā)展為乳腺惡性腫瘤的過(guò)程。 綜上所述，我們認(rèn)為針刺對(duì)雌激素、雌激素受