CD226基因多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關性研究.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種慢性自身免疫病，以T、B淋巴細胞異常活化產生大量自身抗體及損害全身多個器官組織為特征，目前該病具體發(fā)病機制尚不清楚，流行病學及全基因組關聯(lián)性分析表明遺傳因素在SLE的發(fā)病中起重要作用。主要組織相容性復合體(The major histocompatibility complex,MHC)即人類白細胞抗原(human leukocyte antigen

2、,HLA)，已經被證明是SLE重要的易感基因，然而，HLA系統(tǒng)只占了遺傳因素40％的比例，許多非HLA基因被發(fā)現(xiàn)與SLE的發(fā)病顯著相關。最近的研究表明CD226基因的一個單核苷酸多態(tài)性位點(single nucleotide polymorphism,SNP)rs763361(Gly307Ser)在歐洲人群中與多種自身免疫病如1型糖尿病，類風濕關節(jié)炎，自身免疫性甲狀腺炎及多發(fā)性硬化的易感性有關。
　　 CD226是一種分子量為6

3、7-Kda的I型跨膜糖蛋白，參與T細胞的黏附及共刺激作用，廣泛表達于自然殺傷細胞，CD4+及CD8+T細胞，單核細胞，血小板及B細胞亞群。有研究報道SLE患者NK細胞上CD226分子表達缺陷可以導致NK細胞易于凋亡，提示CD226在自身免疫性疾病的發(fā)病中有一定的作用。
　　 本研究擬首次在中國漢族人群中探討SLE與該多態(tài)性位點的相關性，同時探討CD226基因多態(tài)性是否與CD226分子表達相關進而引起一系列臨床表現(xiàn)。具體分為兩個部

4、分：第一部分 CD226基因單核苷酸多態(tài)性位點Gly307Ser在中國漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡人群的研究
　　 目的：在中國漢族人群中對CD226基因單核苷酸多態(tài)性位點Gly307Ser(rs763361)進行檢測，研究CD226-Gly307Ser與SLE遺傳易感性的關系，并探討該多態(tài)性位點與臨床指標的關聯(lián)性。
　　 方法：按照美國風濕病學會于1982年修訂的SLE分類標準選取門診及住院的SLE患者261例，健康對照者279

5、例，應用聚合酶鏈反應-限制性片段多態(tài)性分析(PCR-RFLP)技術，針對rs763361位點進行基因分型；運用PLINK1.06進行Hardy-Weinberg平衡檢驗并分析基因與疾病關聯(lián)性，計算P值，相應的95％可信區(qū)間及OR值，同時分析T危險等位基因及危險基因型TT與臨床指標的相關性。
　　 結果：SLE和健康對照組分別進行Hardy-Weinberg平衡檢測，兩組均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律，Phw分別為

6、0.71和0.18；.與對照組相比，CD226基因rs763361位點T等位基因頻率明顯升高(P=0.018，OR=1.34，95％CI:1.05-1.74)，TT基因型頻率在SLE組高于對照組(P=0.025，OR=1.79，95％CI=1.07-3.01)；在SLE患者中抗dsDNA陽性組較抗dsDNA陰性組T等位基因及TT基因型頻率均明顯增高(P值分別為0.003和0.015)。
　　 結論：在中國漢族人群中，CD226基

7、因rs763361位點與SLE易感性有關且與抗dsDNA的產生相關，那么將來基于該多態(tài)性位點進行功能性研究會為進一步了解自身免疫性疾病的發(fā)病提供線索。
　　 第二部分系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞CD226基因表達的研究
　　 目的：研究CD226基因在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者與健康人外周血單個核細胞(PBMCs)的表達及其與CD226-Gly307Ser多態(tài)性、疾病活動度的相關性。
　　 方法：應用實時

8、熒光定量聚合酶鏈反應檢測SLE患者組90例及健康對照組30例PBMCs CD226 mRNA表達水平，同時分析CD226基因表達量在三種基因型之間是否存在差異，并且探討其與SLE臨床指標的相關性。
　　 結果：SLE組與健康對照組相比，CD226基因表達水平明顯降低(P<0.01)；SLE組三種基因型之間的CD226mRNA表達量差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；紅細胞沉降率、24小時尿蛋白定量、抗核抗體滴度、SLEDAI評分及