報告基因法測定重組人促紅素生物學(xué)活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、重組人促紅素能夠刺激紅細胞增生、分化和成熟,臨床主要用于治療腎性貧血。目前其生物學(xué)活性檢測方法主要是網(wǎng)織紅細胞計數(shù)法,但其操作復(fù)雜,周期長。報告基因法由于具有操作簡便,周期短,特異性好,變異度小等優(yōu)點已經(jīng)成為藥物生物學(xué)活性檢測領(lǐng)域的研究熱點。
　　本研究的目的是建立一種快速檢測重組人促紅素生物學(xué)活性的報告基因法。在UT-7細胞的基礎(chǔ)上,利用重組人促紅素信號通路中的STAT5的DNA核心反應(yīng)元件SIE,GRR,GAS構(gòu)建報告基因載體

2、,構(gòu)建和篩選可穩(wěn)定傳代的活性檢測用的單克隆報告基因細胞株,然后建立報告基因方法并進行相應(yīng)的方法學(xué)驗證,最后對構(gòu)建好的報告基因細胞株進行細胞檢定。本研究成功構(gòu)建了重組人促紅素的報告基因單克隆細胞株UT-7/G7,建立的報告基因法可以在24h內(nèi)完成重組人促紅素的生物學(xué)活性測定,新方法對兩批成品檢測的回收率在81.71％~102.44%之間,日內(nèi)精密度分別為6.6%和7.9%,日間精密度分別為6.0%和7.5%,對34批成品的檢測,證明新方法

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