新型維甲酸衍生物由肌球蛋白輕鏈激酶通過(guò)p38信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的遷移.pdf

1、目的：探討新型維甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基維甲酸酯(ATPR)對(duì)乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231細(xì)胞的遷移影響及可能機(jī)制。
　　方法：用MTT法檢測(cè)不同濃度ATPR對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞增殖能力的影響,劃痕法檢測(cè)ATPR、ML-7,肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)選擇抑制劑、SB,p38通路抑制劑對(duì)單獨(dú)和聯(lián)合用藥對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞遷移的影響,Westernblot法檢測(cè)ATPR處理細(xì)胞48h內(nèi)MDA-MB-231細(xì)胞

2、內(nèi)MLCK的表達(dá)和MLC磷酸化水平,2h和48h內(nèi)p38、ERK、JNK磷酸化水平。在檢測(cè)ML-7處理細(xì)胞2h內(nèi)細(xì)胞內(nèi)p38磷酸化水平和SB和ATPR聯(lián)合用藥后MLCK的表達(dá)。
　　結(jié)果：ATPR對(duì)乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231細(xì)胞增殖具有明顯的抑制作用,ATRA組細(xì)胞OD值從0.439±0.014,0.446±0.025,0.389±0.028,0.146±0.018,0.104±0.013,0.116±0.006到0.115

3、±0.006而ATPR組的OD值從0.474±0.025,0.128±0.009,0.115±0.005,0.109±0.011,0.124±0.004,0.113±0.007到0.133±0.010。ATRA和ATPR對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞抑制半數(shù)抑制濃度IC50分別為:34.08μmol/l和18.06μmol/l。ATPR、ML-7和SB對(duì)細(xì)胞的遷移具有明顯的抑制作用,ATRA和ATPR對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞48h相對(duì)遷移

4、率分別為:90％和50%。Westernblot結(jié)果顯示ATPR顯著降低MLCK的表達(dá)和2h和48h的MLC、p38、ERK、JNK的磷酸化,同時(shí),ML-7可以抑制2h內(nèi)MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)p38磷酸化和SB可以降低48h內(nèi)MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)MLCK的表達(dá)和MLC磷酸化的水平。
　　結(jié)論：ATPR比ATRA對(duì)乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231細(xì)胞的增殖和遷移有更好的抑制的作用,可能與MLCK表達(dá)和MLC磷酸化水平下調(diào)相