櫛孔扇貝感染球狀病毒的病理學(xué)研究.pdf

1、用從膠州灣大規(guī)模死亡櫛孔扇貝體內(nèi)分離出來的球狀病毒注射感染櫛孔扇貝(Chlamysfarreri)，采用流式細(xì)胞術(shù)，研究了病毒對櫛孔扇貝血細(xì)胞類型、血細(xì)胞各亞群比例及血細(xì)胞死亡率的影響；用熒光顯微技術(shù)，研究了病毒感染的櫛孔扇貝血細(xì)胞的體外吞噬和包囊化作用的變化，采用分光光度技術(shù)，研究了病毒對櫛孔扇貝血細(xì)胞和血清中參與免疫防御的水解酶、氧化酶、活性氧(ROIs)和一氧化氮(NO)等體液因子的影響，采用酶組織化學(xué)方法對經(jīng)病毒感染的櫛孔扇貝主

2、要器官中非特異性酯酶(NSE)和過氧化物酶(POD)活力和分布進(jìn)行了研究。結(jié)果表明： 應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)散射光發(fā)現(xiàn)櫛孔扇貝血細(xì)胞被明顯地分為3個類群：透明細(xì)胞、小顆粒細(xì)胞和大顆粒細(xì)胞，經(jīng)病毒感染的櫛孔扇貝血細(xì)胞也分為這3個類群，但病毒感染的扇貝血細(xì)胞各亞群的比例同對照組相比有顯著的差異，在24h、48h和72h，實驗組透明細(xì)胞比例顯著高于對照組，并呈逐漸升高趨勢；在8h、24h、48h、72h，實驗組大顆粒細(xì)胞比例顯著降于對照組；在

3、24h、48h、72h和128h，實驗組血細(xì)胞的死亡率顯著高于對照組。 經(jīng)吖啶橙(AO)染色、熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)在病毒感染期間實驗組扇貝血細(xì)胞的體外吞噬率和包囊化作用都顯著高于對照組，隨著病毒感染時間的延長扇貝血細(xì)胞吞噬率和包囊化率呈逐漸升高又降低的趨勢。 應(yīng)用分光光度技術(shù)發(fā)現(xiàn)經(jīng)病毒感染的櫛孔扇貝血清中活性氧H2O2含量和依賴鹵素的髓性過氧化物酶(MPO)活性在病毒感染的各個時間段，實驗組顯著高于對照組，血細(xì)胞中的酶活性