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文檔簡介
1、為了解決日本雪椿引進困難,種子和種苗來源不足,難以滿足林業(yè)建設和構建生態(tài)文明社會的需求,本實驗以雪椿葉片和莖段作為外植體,研究其再生植株體系,獲得改良的雪椿外植體最佳消毒方式及時間,有效減輕雪椿試驗材料褐變的方法,雪椿再生體系建立的培養(yǎng)條件,雪椿愈傷組織誘導、增殖及分化的最佳激素配比,莖段誘導芽及芽增殖的最佳激素配比,再生植株生根方式方法。主要研究結果如下:
?。?)雪椿外植體最佳消毒組合及時間
選取生長健壯的雪椿植株
2、,剪取雪椿兩年生枝條嫩梢的莖段用自來水清洗30min,洗去浮塵,然后用洗潔精進一步清洗,再用自來水將洗潔精殘留沖洗干凈,然后置于無菌室超凈工作臺上,用無菌水清洗1min,再用75%的乙醇浸泡20-30s,后用無菌水沖洗2次,放入0.1%HgCl2中,8min,取出后用無菌水沖洗5遍,置于無菌濾紙上吸干水分,接種于附加不同植物生長調節(jié)劑的MS培養(yǎng)基上做初代培養(yǎng)。
?。?)雪椿愈傷組織誘導,增殖及分化的最佳激素配比
MS+
3、6-BA2.0mg/L-1+2,4-D0.5mg/L-1培養(yǎng)基是雪椿新生葉片愈傷組織誘導的最佳培養(yǎng)基,MS+6-BA15mg/L-1+IBA0.5mg/L-1是葉片誘導愈傷組織的最佳增殖培養(yǎng)基;MS+6-BA3mg/L-1+NAA0.2mg/L-1+IBA0.5mg/L-1是愈傷組織分化的最佳培養(yǎng)基;莖段誘導的愈傷組織具備分化不定芽的潛能。
?。?)莖段誘導芽及芽增殖的最佳激素配比
在添加6-BA2.0mg/L-1+I
4、BA0.5mg/L-1的MS誘導培養(yǎng)基中,以雪椿的嫩莖段為外植體,芽的誘導率達到97%,MS+6-BA2mg/L-1+NAA0.15mg/L-1+ZT2.0mg/L-1,MS+6-BA3mg/L-1+IBA0.5mg/L-1+NAA0.5mg/L-1適合不定芽的增殖培養(yǎng),增殖系數(shù)分別達到83.2%和79.5%。
?。?)雪椿植株的生根方式
日本雪椿不定芽生根的誘導方法是試管外濾紙橋生根法,該技術在溫度20-30℃、濕度
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