重組人乙酰肝素酶的克隆表達及其生物學特性的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、乙酰肝素酶(Heparanase,HPA)是能特異性降解細胞外基質和基底膜中的硫酸肝素糖蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan,HSPG)的內切糖苷酶.由于HSPG具有抑制腫瘤轉移的重要作用,HPA是多種腫瘤具有轉移活性的標志之一,已經成為了研究腫瘤轉移的重要靶點.但由于HPA獲取困難,其分子結構、生物學功能、活性調節(jié)等多方面尚待進一步闡明.近年來的研究發(fā)現全長HPA cDNA編碼了HPA酶原前體,在合成與分

2、泌的過程中去除了信號肽,形成低活性的HPA酶原,再經過特異性的調控激活后被未知的水解酶切割為大小不同的2個亞基,二者再通過非共價結合形成異源二聚體,此異源二聚體可能就是HPA的活性形式.為探究HPA結構與功能的關系以及其在腫瘤轉移中的作用,需要獲得HPA重組蛋白以及其抗體.因此該文利用基因重組技術,構建表達巴斯得畢赤酵母和大腸桿菌重組工程菌,實現了在大腸桿菌中以融合蛋白形式表達HPA酶原及其大亞基,并分析了影響HPA基因在不同表達系統中

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