益腎通絡方對腎病綜合征大鼠的藥效作用及其分子機制研究.pdf

1、目的：探討益腎通絡方治療腎病綜合征大鼠和影響大鼠腎小球系膜細胞增殖的作用機制。 方法 1．采用陽離子牛血清白蛋白復制腎病綜合征大鼠模型，隨機分為5組，即模型組，對照組(腎炎四味片組)，益腎通絡方低、中、高劑量組，每組各10只，并以10只同批正常大鼠為正常組。分別測定大鼠24小時尿蛋白，血清白蛋白，血肌酐，血尿素氮；觀察大鼠腎組織病理形態(tài)，測定面積比；免疫組織化學方法檢測大鼠腎組織白細胞介素-6(IL-6)、轉化生長因子-B1(T

2、GF-B1)、Smad7的分布和含量。2．制備益腎通絡方大鼠血清，以脂多糖為刺激因子，將體外大鼠腎小球系膜細胞分為5組，即空白組、模型組(脂多糖組)、益腎通絡方低、中、高劑量組。以甲基偶氮唑鹽法(MTT)檢測系膜細胞增殖情況，以逆轉錄．聚合酶鏈反應方法(RT-PCR)檢測系膜細胞IL-6、TGF-B1、Smad7信使核糖核酸(mRNA)表達。 結果： 1．益腎通絡方各劑量組24小時尿蛋白含量、血清肌酐、血尿素氮下降(P<0.01

3、)；血清白蛋白提高(P<0.01)；腎臟病理損害均有不同程度減輕，面積比減少(P<0.01)；IL-6、TGF-B1在腎組織的沉積減少，Smad7在腎組織的表達提高，其作用優(yōu)于模型組和腎炎四味片組，以益腎通絡方中、高劑量為佳(P<0.05，P<0.01)。2．IL-6與TGF-B1呈線性正相關(P<0.01)，Smad7與IL-6或TGF-β1呈負相關(P<0.05，P<0.01)。3．益腎通絡方含藥血清對體外大鼠腎小球系膜細胞增殖有明

4、顯抑制作用(P<0.05，P<0.01)，以高劑量為佳(P<0.01)；高劑量含藥血清組Smad7mRNA的表達明顯上調，而IL-6mRNA和TGF-β1mRNA的表達下調(P<0.01)。結論 1．益腎通絡方對腎病綜合征大鼠有良好的治療作用，能改善相關蛋白，改善腎功能，減輕腎臟病理損害；其作用機制之一在于抑制腎小球系膜細胞增殖。2．益腎通絡方能有效地抑制腎小球系膜細胞增殖；調節(jié)Smad7/TGF-β1/IL-6三者之間的相互作用是其分