sipW基因突變對(duì)解淀粉芽孢桿菌PEBA20生物膜形成及抑菌活性的影響.pdf

1、sipW基因是芽孢桿菌屬細(xì)菌的重要調(diào)控基因，表現(xiàn)出多種功能。本研究以植物內(nèi)生生防細(xì)菌解淀粉芽孢桿菌PEBA20為材料，利用同源重組法構(gòu)建了sipW基因缺失突變株，進(jìn)而測(cè)定了該基因?qū)EBA20生物膜形成、抑菌活性和芽孢形成的影響。
　　本文主要研究結(jié)果如下：
　　1、將sipW同源前臂和同源后臂的連接產(chǎn)物sipWF-sipWB與自殺質(zhì)粒PMUTin4經(jīng)雙酶切、T4連接酶連接得到重組自殺質(zhì)粒sipWF-sipWB-PMUTin

2、4。將重組質(zhì)粒經(jīng)電轉(zhuǎn)化方法轉(zhuǎn)化入B.amyloliquefaciens PEBA20感受態(tài)細(xì)胞中，采用紅霉素篩選法篩選獲得sipW基因缺失的PEBA20突變株；以缺失株DNA為模板進(jìn)行PCR篩選陽(yáng)性克隆，并通過(guò)測(cè)序確定獲得sipW基因缺失突變株。
　　2、觀察了B.amyloliquefaciens PEBA20 sipW基因缺失突變株的液氣界面和固氣界面生物膜形成過(guò)程，發(fā)現(xiàn)sipW基因缺失突變株固氣界面生物膜結(jié)構(gòu)復(fù)雜程度略顯簡(jiǎn)單

3、，液氣界面生物膜也較野生株為簡(jiǎn)單，表明sipW基因調(diào)控了解淀粉芽孢桿菌生物膜形成過(guò)程。
　　3、檢測(cè)B.amyloliquefaciens PEBA20野生株和sipW突變株對(duì)三種植物病原真菌和三種植物病原細(xì)菌的抑菌活性。結(jié)果顯示，與野生株相比，sipW基因缺失突變株對(duì)三種指示真菌和三種指示細(xì)菌抑菌效果均下降，并且對(duì)其中某些真菌和細(xì)菌的抑菌作用差異顯著水平較為顯著。表明sipW基因的缺失突變影響了解淀粉芽孢桿菌對(duì)真菌和細(xì)菌的抑菌作