NGF和BDNF聯(lián)合誘導NSC分化及其在192-IgG-saporin致阿爾茨海默病模型鼠中的應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、廣州醫(yī)科大學博士研究生學位論文NGF和BDNF聯(lián)合誘導NSC分化及其在192IgGsapin致阿爾茨海默病模型鼠中的應用CombinedEffectofNGFBDNFontheNeuronalDifferentiationofNeuralStemCellonRatModelofAlzheimer’sDiseasewith192IgGsapin專業(yè)名稱：稱：神經病學研究生：劉：劉菲菲學號：號：2011310218指導老師：龍師：龍大宏教授

2、教授本課題受廣東省自然科學基金資助項目(9151063101000016)和廣州市屬高校科研計劃項目(2012C042)資助。廣州醫(yī)科大學廣州二0一四年五月3.2影響NSC分化的因素................................................................................253.3NSC體外培養(yǎng)的不足..................................

3、................................................263.4神經球轉化為單層貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點..........................................................264.結論........................................................................................

4、................................27第二部分NGF聯(lián)合BDNF對體外培養(yǎng)的神經干細胞分化為神經元的影響...........281材料和方法..............................................................................................................281.1動物、主要試劑和儀器.........

5、.............................................................................281.2NSC的取材和培養(yǎng)..............................................................................................301.3單獨使用NGF或BDNF和兩個因子的聯(lián)合應用........

6、....................................301.3.1NGF和BDNF濃度的確定......................................................................301.3.2因子的單獨使用和聯(lián)合應用對NSC分化及相關分子改變的影響......301.4免疫細胞化學免疫熒光......................................

7、...............................................311.5QPCR步驟..........................................................................................................311.6總蛋白的提取和濃度測定........................................

8、..........................................321.6.1細胞裂解提取總蛋白...............................................................................321.6.2蛋白濃度測定......................................................................

9、.....................321.7蛋白免疫印跡......................................................................................................331.7.1WB試劑準備.........................................................................

10、....................331.7.2WB分離膠和濃縮膠的制備.....................................................................341.7.3WB操作步驟.............................................................................................351.8統(tǒng)

11、計學分析..........................................................................................................362結果.........................................................................................................

12、................362.1NGF和BDNF誘導單層貼壁培養(yǎng)NSC分化....................................................362.2比較因子的單獨使用和聯(lián)合應用對NSC分化的影響....................................382.3WB檢測PD98059對PERK的水平變化和神經元分化比例的影響.............422.4QPCR檢測N

13、GF或(和)BDNF對bHLH家庭基因的表達變化的影響..........443討論.........................................................................................................................473.1NGF和BDNF對NSC分化為神經元的疊加作用.............................

14、.......473.2ERK的磷酸化參與NGF和BDNF對NSC的疊加作用..........................483.3MASH1、NGN1和NeuroD的表達變化參與NGF和BDNF對NSC的疊加作用..............................................................................................................

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