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文檔簡介
1、目的: 觀察攝入不同濃度的碘化鉀水對Balb/c成年小鼠和子代20日齡、40日齡小鼠小腦的形態(tài)學改變,探討碘缺乏或碘過量對成年小鼠、子代小鼠小腦的形態(tài)及功能的影響。 方法: 選用斷乳一個月,體重在16-20g的SPF-VAF級的Balb/c小鼠,雌雄各半,隨機分為5組:低碘組(LI),適碘組(NI),5倍碘組(5HI),10倍碘組(10HI),50倍碘組(50HI)。LI組動物飼以低碘飼料(平均碘含量<50μg/
2、kg),其余各組飼以正常飼料(平均碘含量300μg/kg),LI組和NI組飲用碘含量為0μg/L的去離子水,其余各組飲用含不同濃度碘化鉀的去離子水,其飲水中碘含量分別為1200μg/L(5HI),2700μg/L(10HI),14700μg/L(50HI)。小鼠每日的碘攝入量估計如下:小鼠每日進食5g,進水5ml,各組動物每日碘攝入量分別為<0.25μg/d(LI),1.5μ/d(NI),7.5μg/d(5HI),15μg/d(10HI
3、),75μg/d(50HI)。喂養(yǎng)三個月時,取出部分小鼠雌雄3:1合籠,子代小鼠用同樣的方法喂養(yǎng)。取用以上方法喂養(yǎng)3個月的成年小鼠和20、40日齡子代小鼠作為研究對象。分別采用焦油紫染色、免疫組化(NSE、GFAP、MBP)染色和鍍銀染色觀察小腦的形態(tài)學改變,并對Purkirlje細胞層NSE陽性神經元和髓質GFAP陽性星形膠質細胞和MBP陽性骨髓神經纖維進行形態(tài)計量學分析。應用Motic Images Advanced 3.2圖象分析
4、系統(tǒng)測量以下指標:NSE陽性神經元和GFAP陽性星形膠質細胞的面數(shù)密度(N<,A>)、體積密度(V<,v>)、細胞質的平均光密度,MBP陽性骨髓神經纖維平均光密度,小腦皮質分子層厚度和顆粒層厚度、Purkinje細胞層內浦氏細胞胞漿中尼氏體與其胞漿的面積比。 結果: 1.實驗3個月成年小鼠:與NI組比較,LI組TT<,4>、FT<,4>含量明顯降低(p<0.01),10HI組和50HI組血清TT<,3>、FT<,3>都明
5、顯降低(P<0.01)。LI組尿碘顯著低于NI組,各碘過量組尿碘與NI組比較成倍增高。各組小鼠腦絕對重量和相對重量無明顯變化,LI組體重有所減輕(P<0.01)。各組小腦山頂區(qū)的分子層、顆粒層厚度、小腦浦肯野細胞層浦肯野細胞胞漿中尼氏體的面積比均無明顯差異(P>0.05)。與NI組比較,LI組和50HI組浦肯野細胞層NSE陽性神經元胞質平均光密度明顯降低(P<0.05),5HI組和10HI組無明顯變化。各組NSE陽性浦肯野氏細胞的N<,
6、A>、V<,v>無明顯變化(P>0.05)。各組小腦髓質GFAP陽性星形膠質細胞的N<,A>、V<,v>、細胞質平均光密度和MBP陽性神經纖維平均光密度均無明顯變化。 2.實驗20日齡和40日齡仔鼠:a.實驗20日齡和40日齡各組仔鼠腦相對重量無明顯變化, LI組、50HI組體重和腦絕對重量比NI組明顯降低(P<0.01)。b.與NI組比較,LI組、50HI組分子層厚度明顯降低(P<0.05),顆粒層厚度明顯增加(P<0.05)
7、,LI組小腦浦肯野細胞層浦肯野細胞胞漿中尼氏體的面積比明顯降低(P<0.05)。c.LI組、50HI組仔鼠浦肯野細胞層NSE陽性神經元胞質平均光密度明顯降低(P<0.01),其余各碘過量與NI組比較無明顯變化。20日齡LI組NSE陽性神經元的V<,v>比NI組明顯降低(P<0.01),40日齡LI組NSE陽性神經元的N<,A>、V<,v>比NI組降低(P<0.05)。LI組小腦髓質GFAP陽性膠質細胞的N<,A>、V<,v>和細胞質平均
8、光密度明顯降低(P<0.01); 50HI組N<,A>和細胞質平均光密度明顯降低(P<0.05),V<,v>未見明顯變化(P>0.05);其余各碘過量組與NI組比較未見明顯變化。LI組、50HI組與同日齡NI組比較,小腦髓質MBP陽性神經纖維平均光密度明顯降低(P<0.01);其余各碘過量組與NI組比較,未見明顯變化。 結論: 1.碘缺乏或碘過量對成年業(yè)已發(fā)育成熟的小腦皮質和髓質不會產生明顯的形態(tài)學改變,但由于長期碘缺乏
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