玉米耐低氮突變體的體細胞篩選.pdf

1、氮是玉米生長發(fā)育的重要元素之一，近年來隨著產(chǎn)量的提高，我國土壤中的氮含量在迅速下降，極低的氮含量已不同程度地影響了玉米的生長與產(chǎn)量。我國大部分土壤氮含量僅有0.02％-0.2％，而氮肥的當季利用率只有30％-40％，因此篩選和選育耐低氮玉米新種質(zhì)、新品系對瘠薄地區(qū)更具有實際意義。本試驗以玉米幼胚作外植體誘導愈傷組織，通過體細胞培養(yǎng)進行玉米耐低氮突變體的篩選。 將幼胚誘導出的愈傷組織轉(zhuǎn)入低氮濃度的篩選培養(yǎng)基中連續(xù)篩選4次，篩選出的

2、耐性愈傷組織轉(zhuǎn)入正常培養(yǎng)基中恢復培養(yǎng)3次，最終得到耐低氮愈傷組織變異體，分化出的再生植株R0，經(jīng)溫室緩苗后移栽大田，自交授粉得R1代種子。 篩選分兩種方法進行：等濃度篩選和梯度篩選。篩選過程中進行愈傷組織生長量測定同時觀察其類型變化，并對R1代種子千粒重、品質(zhì)和R1代幼苗硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶活性進行測定。試驗結(jié)果如下： (1)降低培養(yǎng)基中氮含量，愈傷組織的生長減慢，濃度越低生長越慢，隨著氮含量的降低，愈傷組織類型也

3、發(fā)生了較大的變化，Ⅱ型愈傷組織逐漸減少，Ⅲ型愈傷組織增多。根據(jù)N、T和X系列濃度對愈傷組織影響的比較，認為在選擇耐低氮突變體時，降低銨態(tài)氮或同時降低銨態(tài)氮和硝態(tài)氮進行篩選的效果要好于降低硝態(tài)氮的篩選效果。 (2)由于等濃度篩選和梯度篩選Ⅱ型愈傷組織的比例比較接近，為了避免梯度篩選過程中存在適應性變異，建議用等濃度篩選法進行耐低氮突變體的篩選。 (3)通過對R1代種子品質(zhì)和R1代幼苗硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶活性的測定，初