發(fā)酵法生產(chǎn)番茄紅素的工藝研究.pdf

1、本文主要研究了三孢布拉氏霉菌發(fā)酵生產(chǎn)番茄紅素的工藝。針對(duì)菌體老化而導(dǎo)致發(fā)酵終期番茄紅素產(chǎn)量降低的問題，首次采用了孢子懸液直接接種的方式，并對(duì)菌種孢子的生長(zhǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)菌體在28℃下生長(zhǎng)3d，然后在18℃繼續(xù)生長(zhǎng)2d，此時(shí)表面的孢子生長(zhǎng)狀況最好，數(shù)量最多；并且充足的氧氣和良好的光照條件對(duì)生長(zhǎng)有利。另外，提出了正負(fù)菌的孢子懸液按比例混合后直接進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)的一級(jí)培養(yǎng)工藝，該工藝穩(wěn)定、簡(jiǎn)便，不僅提高了番茄紅素的產(chǎn)量，而且縮短了發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)

2、間，并確定了該工藝的發(fā)酵周期為5d，阻斷劑的最優(yōu)添加時(shí)間為第60h。 在三孢酸及其結(jié)構(gòu)類似物對(duì)番茄紅素發(fā)酵影響的研究中，分別討論了各種促進(jìn)因子的最優(yōu)添加量。其中，每100mL培養(yǎng)基中，三孢酸的最優(yōu)添加量為2μg，可使其產(chǎn)量提高44.22％，對(duì)番茄紅素的刺激作用最顯著；相同條件下，脫落酸、α-紫羅酮、VitaminA和p-紫羅酮的最優(yōu)添加量依次為0.1mmol、30mg、0.1mmol和0.5mmol。另外，比較了Tris-H2S

3、O4溶液(pH=7.5)和95％的乙醇溶液對(duì)發(fā)酵的影響，最終選定Tris-H2SO4溶液作為三孢酸的溶劑。 本文采用高速逆流色譜和半制備高效液相色譜兩種方法，對(duì)三孢布拉式霉菌干菌體中的有效組分進(jìn)行了分離分析。前者得到了一種未知物，純度達(dá)到97.1％，通過紅外、核磁等測(cè)定，初步推測(cè)其結(jié)構(gòu)式為CH3(CH2)12CO-CH=CH2。半制備高效液相色譜法僅處于研究初期，實(shí)驗(yàn)確定了流動(dòng)相的最佳配比(乙腈：二氯甲烷=85：15，V/V)和