激活巨噬細胞誘導鼠角膜新生血管形成的實驗研究.pdf

1、中山大學碩士學位論文激活巨噬細胞誘導鼠角膜新生血管形成的實驗研究姓名：栗占榮申請學位級別：碩士專業(yè)：眼科學指導教師：梁丹20090525中I I J 大學碩J ：學位論文 激活巨噬細胞誘導鼠角膜新生血管形成的實驗研究素下，觀察激活的巨噬細胞是否能誘導新牛血管形成，進而探討其相關(guān)的調(diào)節(jié)機制。類似研究國內(nèi)外文獻尚未見報道。目的觀察激活巨噬細胞可否誘導新生血管形成，探討其中可能的作用機制，為新生血管性疾病的治療研究提供新的參考途徑。方法1 ．

2、細胞的獲得、分離、培養(yǎng)、鑒定、相關(guān)因子表達檢測及D i I 標記1 ．1 激活巨噬細胞的獲得、分離和培養(yǎng)S D 大鼠腹腔注射石蠟油l m l ，4 天后，無菌條件下收集腹腔灌洗液中的細胞。1 6 4 0 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)收集到的細胞，觀察細胞形態(tài)及其生長狀態(tài)。1 ．2 激活巨噬細胞的鑒定1 ．2 ．1 免疫熒光檢測巨噬細胞相關(guān)抗原收集到的大鼠腹腔細胞行C D 6 8 、C D l 6 3 免疫熒光染色，檢測巨噬細胞的特異抗原表達。同時行P

3、 D G F 和T G F —D 染色，對巨噬細胞激活狀態(tài)進行鑒定，行M M P ．9 、V E G F 促血管形成因子的表達檢測。1 ．2 ．2 流式細胞儀檢測巨噬細胞吞噬功能F I T C _ d e X t 啪吞噬實驗鑒定巨噬細胞的吞噬功能及巨噬細胞在腹腔收集液細胞中所占的比例。1 ．2 ．3 逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈式反應( I m P c R ) 檢測激活巨噬細胞相關(guān)因子的表達對巨噬細胞P D G F 和T G F ．B 的m R N